降胆固醇霉菌发酵条件的优化及诱变育种

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本文以胆固醇降解率为指标,对从不同环境的土壤、肉食动物粪便、发酵食品和灭菌不彻底的培养基中筛选到的降解胆固醇的20株霉菌进行复筛.结果发现N-81和0-17的胆固醇降解率最高,并根据其形态结构特点认为N-81和0-17都属于青霉属.从最佳碳源、最佳氮源、最佳碳氮源比例、发酵培养基初始pH、种子培养基到发酵培养基的接种量、发酵培养基的通气量和培养温度等方面对N-81的发酵条件进行单因素的优化.使用了多种不同的诱变方法(紫外线、DES、EMS、NTG、UV+DES和原生质体诱变)对N-81进行诱变育种,结果发现以NTG和原生质体诱变正变率最高、效果最佳.对N-81进行诱变处理后,以胆固醇氧化酶酶活为指标进行初筛和复筛得到酶活最高的菌株N14(1514U/L)、Y11(1247 U/L),产酶稳定性检验得知这两株菌产酶稳定.
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