结直肠癌中微小RNA调控网络识别

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MicroRNA是一类约22bp的非编码单链RNA分子其可以在转路后水平调节基因的表达,这些小分子可以在真核基因表达调控中发挥着非常重要的作用。并且,miRNA的表达模式具有分化的位相性和时序性。但是miRNA在结直肠癌中的调控网络依然存在很多不明了的环节,因此,在本文中我们选取了两个在结直肠癌中具有重要作用的miRNA,并对其表达调控机制进行了研究。首先我们利用miRNA测序和Northern Blot的方法检测到miR-145和miR-143在结直肠癌中表达显著下调,相反,如果在结直肠癌细胞中过表达miR-145和miR-143则明显抑制肿瘤细胞的增殖,细胞浸润及成瘤能力。进一步研究中,我们通过自行研发的miRNA靶标预测软件KeyTar发现miR-143的潜在靶标是受体酪氨酸蛋白激酶ErbB3口GTP酶K-ras,而mi R-145的潜在靶标是N-ras。随后我们通过萤光素酶报告实验进一步验证了这个结论,同时,Western Blot结果表明miR-143的高表达可以抑制ErbB3和K-ras的表达,miR-145的高表达可以抑制N-ras的表达,这些结论也表明了miR-143和miR-145通过对靶基因的抑制作用从而对结直肠癌的发生和发展起到重要作用。
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