结核分枝杆菌Rv0901基因在耻垢分枝杆菌的克隆表达及其功能研究

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结核病是世界上感染性疾病导致的死亡率最高的疾病之一,其致病及免疫保护机制尚未完全阐明。耐药结核杆菌的出现使结核病的防治变得复杂化,因此探索结核杆菌的致病机制和新的防治策略十分重要。结核分枝杆菌H37Rv基因组测序的完成和更新,为结核杆菌基因组学和蛋白组学的研究提供了重要而更加精确的资料。 初步研究表明,一组尚未确定生物学特征和功能的结核杆菌假想蛋白基因,可能与其毒力致病机制有关。这些蛋白基因皆位于细胞壁和细胞活动基因及其调节蛋白编码基因的下游,受同一操纵子控制,其编码产物是构成结核杆菌细胞壁的重要构件,尤以Rv0901基因最为引人注目。该基因在1998年基因组测序完成时划分为编码未知蛋白类及保守的假想蛋白类基因,于2002年基因组更新时重新划入了细胞壁和细胞突(cell-wall and cell processes category)一类。研究发现,结核杆菌细胞壁的特殊结构和成分在结核杆菌与宿主细胞(主要是巨噬细胞)的相互作用及其致病中发挥着重要的作用。为研究Rv0901基因的功能及其与结核杆菌毒力、致病机制的关系,我们首先将该基因528bp片段首次从基因组中扩增出,并在原核融合表达载体pGEX-1λT中成功表达了GST—
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