在线旋光检测原理与技术研究

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手性是自然界的基本属性之一,手性化合物常有截然不同的活性。色谱是目前最主要的手性分析技术,但在手性样品的分析测试中,由于旋光检测器的缺乏,致使色谱技术在手性分析中的应用受到很大限制。旋光检测技术可以区分手性化合物的对称性,与色谱检测技术结合可以实现手性化合物分离,在生物制药、成分分析等领域起着重要作用。本论文从原理和技术上对旋光检测系统进行研究和分析,并对旋光检测系统进行标定和测试。通过理论和实验研究表明,旋光检测器的制作首要解决的问题便是光源的选择,因为不同波长光的旋光率不同,所以光源的选择对旋光检测器是非常重要的。实验主要对激光、LED光源、白炽灯、白炽灯加滤光片组合进行比较,最后决定选择体积小、驱动电源简单、价格便宜、单色性好的LED光源作为旋光检测器的光源。氦氖激光器体积太大,不符合实验光源体积小的要求。人眼对绿色比较敏感,所以选择波长555nm的绿色LED光源。仪器的硬件是以常见旋光检测器的光学系统、电学系统、机器结构骨架和程序设计为基础,通过设计出偏振角度计数器等模块,最终组合成偏振角度和时间关系的在线分离手性化合物的旋光检测器;软件是以Delphi7进行编程,通过对纯净水和两种葡萄糖溶液进行旋光现象检测,用曲线拟合的最小二乘法处理数据确定这三种样品的偏振角度,具体分析了二次拟合和一次拟合两种算法。实验表明,一次拟合比二次拟合简单,精度很相近,从实验测量速度和精度综合考虑,一次拟合比二次拟合更适合于本实验的旋光检测。为了验证系统检测的准确性,实验采用自制旋光检测器和WZX-1光学度盘旋光仪分别对L-酪氨酸溶液进行测量,计算出L-酪氨酸溶液的旋转角度的平均值,并与标准值进行比较,验证了系统检测的准确性;分别对纯净水、低浓度浓度葡萄糖溶液、高浓度葡萄糖溶液和L-酪氨酸溶液连续采集20组数据,检验了系统对手性物质测量的稳定性及准确性;再分别对低浓度浓度葡萄糖溶液、高浓度葡萄糖溶液和L-酪氨酸溶液进行连续检测,验证了系统对手性物质在线连续测量的稳定性及准确性。研究结果表明,该系统对旋光物质的检测精度可以满足实验的需求,并可以直接在用户界面清晰读出该物质的旋转角度,从而能够准确的判别出该物质是左旋还是右旋。
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