目的本实验以纯钛试件为研究对象,拟通过碱、稀酸、热处理在纯钛表面构建纳米级网状生物活性层,体外评价该生物活性层对骨髓间充质干细胞生物活性的影响。材料与方法厚0.25 mm的圆形纯钛片72枚,经碳化硅砂纸逐级打磨抛光至表面呈镜面状,丙酮、无水乙醇、去离子水中超声震荡清洗各15 min,干燥备用,制备好的试件称为光滑组试件(PT组);随机选取48枚光滑试件放入60℃5mol/L Na OH溶液中浸泡24 h,去离子水轻柔冲洗试件,干燥备用;随机选取24枚碱处理后的试件,放入40℃5mmol/L HCL水溶液中浸泡24 h,去离子水轻柔冲洗试件,干燥备用。将碱处理试件、碱酸处理试件,在电阻炉中600℃条件下热处理1 h,随炉自然冷却至室温。制备好的试件分别作为碱热处理组(AH组)试件、碱酸热处理组(AAH组)试件。采用场发射扫描电镜(FE-SEM)和X射线能量色散谱仪(EDS)对各组试件表面进行形貌观察和元素组成分析。将三组钛试件与小鼠骨髓间充质干细胞共培养,体外评价碱酸热处理构建的生物活性层对BMSCs粘附、增殖和分化的影响。结果FE-SEM观察显示PT组试件表面可见砂纸打磨留下的划痕;AH组试件表面可见纳米网状(絮状)结构形成;AAH组试件表面仍可见纳米絮状结构,且与AH组相比,表面絮状结构未见明显改变。EDS结果显示PT组试件表面仅见钛元素和硅元素;AH组试件表面元素有钛、硅、钠和氧;AAH组试件表面元素有钛、硅和氧。PT组细胞伪足少且伸展较局限,AH组试件表面细胞伸展良好,呈长梭形,有伪足伸入微孔结构内。AAH组试件表面细胞伸展良好,呈长梭形,较AH组细胞相比,细胞伸展面积大,胞体周围伸出的细小触角多。3组试件随时间变化,细胞增殖活性有增长趋势。细胞接种第1天,3组试件细胞增殖活性差异无统计学意义;与PT组相比,AH、AAH组在细胞接种第3、5天增殖活力差异有统计学意义(P<0.05);与AH组相比,AAH组在细胞接种第3、5天增殖活力差异有统计学意义(P<0.05)。3组试件随时间变化,细胞碱性磷酸酶活力有增长趋势。细胞接种第3天,3组试件细胞碱性磷酸酶活性差异无统计学意义。细胞接种第5天,与PT组相比,AH、AAH组细胞碱性磷酸酶活性增长,差异有统计学意义(P<0.05);细胞接种第7天,3组间差异有统计学意义,SNK法比较显示3组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过碱、稀酸、热处理能够在纯钛表面构建纳米网状生物活性层,体外细胞学结果表明钛表面纳米网状结构生物活性层能促进干细胞的粘附、增殖和分化,具有良好的生物相容性。因此,可望成为改善种植体表面生物活性的一种有效方法。