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目的：通过临床胃组织标本检测、细菌与细胞共培养实验及重组质粒转染细胞实验，探讨H.pylori和CagA蛋白对胃黏膜上皮ENO1表达的影响，为H.pylori致病机制和胃癌早期诊断研究提供基础。 方法：1.临床标本采集及检测：①从河南省人民医院胃镜室收集慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生患者胃黏膜组织标本及临床资料，检测H.pylori感染，并通过qPCR检测组织中ENO1mRNA的表达;②从该院病理科收集胃癌患者的癌组织及癌旁组织标本，用免疫组织化学染色法检测并分析组织中ENO1的表达。 2.H.pylori与胃黏膜上皮细胞共培养实验：用H.pylori MEL-Hp27(cagA+)菌株分别与正常胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株AGS共培养：①检测当感染复数（Multiplicity of infection，MOI）分别为50∶1、100∶1和200∶1时，培养24h的细胞中ENO1mRNA表达水平;②检测MOI=200∶1时，与H.pylori共培养2h、6h、12h和24h的细胞中ENO1mRNA的表达水平。 3.H.pylori cagA基因真核表达载体的构建和细胞转染：①重组质粒的构建：从H.pylori MEL-Hp27菌株基因组DNA中，经PCR扩增获取cagA基因;采用质粒载体pcDNA3.1(+)和无缝克隆技术，构建cagA基因的真核表达载体pcDNA-cagA;②细胞转染：实验组以pcDNA-cagA分别转染GES-1和AGS细胞，对照组采用空质粒pcDNA3.1(+)转染细胞;③ENO1表达检测：应用qPCR方法，分别在转染后48h和72h检测细胞ENO1的mRNA表达。 结果：1.病例信息：慢性浅表性胃炎组与胃癌前疾病组及胃癌组在年龄和性别分布上的差异有统计学意义(P＜0.05），在H.pylori感染率上的差异不具有统计学意义(P＞0.05）。 2.胃组织标本检测结果 慢性浅表性胃炎和癌前疾病组织标本：①在慢性浅表性胃炎病例中，H.pylori感染组ENO1mRNA的表达水平高于未感染组(P=0.037）;②在胃癌前疾病病例中，H.pylori感染组与未感染组ENO1mRNA表达水平差异无统计学意义（P=0.630）;③在浅表性胃炎和胃癌前疾病合并人群中，H.pylori感染组ENO1mRNA表达水平显著高于未感染组(P=0.047)。 胃癌及癌旁组织标本：①在胃癌病例中，H.pylori感染阳性与阴性组间胃癌组织ENO1表达水平的差异无统计学意义(P＞0.05);②低分化胃癌组织ENO1表达水平低于中、高分化胃癌组织（P=0.038）;③与癌旁组织相比，ENO1在胃癌组织中呈高表达(P=0.004)，且主要定位于癌细胞的胞膜和胞质。 3.H.pylori与胃黏膜上皮细胞共培养实验：①H.pylori感染胃癌细胞AGS24h时，MOI为50∶1组的ENO1表达水平虽有升高，但差异无统计学意义（P＞0.008）。MOI为100∶1和200∶1组细胞中ENO1表达水平均显著升高(P＜0.008)。 结果显示，随着MOI的增加，细胞中ENO1的表达水平升高;②用H.pylori感染正常胃上皮细胞GES-124h，MOI为50∶1组的ENO1表达下调(P＜0.001)。MOI为100∶1组与对照组间细胞中ENO1表达水平无统计学差异(P=0.996)。MOI为200∶1组的ENO1表达显著上调(P=0.005);③当MOI=200∶1时，与H.pylori感染阴性组比，AGS细胞在H.pylori感染2h和6h时ENO1表达显著下调(P＜0.05)，在12h和24h时则显著上调（P＜0.05）。而GES-1细胞只在感染24h时检测到ENO1表达上调(P＜0.05)。 4.H.pylori cagA真核表达载体的构建与细胞转染：①经PCR、酶切及测序鉴定证实真核表达质粒peDNA-cagA构建成功;②用pcDNA-cagA分别转染GES-1和AGS细胞，采用qPCR和Western blot法检测到cagA基因的表达，证实pcDNA-cagA转染细胞成功;③AGS和GES-1细胞在转染后48h和72h ENO1mRNA的表达水平显著高于对照组（P＜0.05），且实验组细胞ENO1mRNA的表达水平与细胞中cagAmRNA的水平间有呈正相关（P＜0.05）。 结论：1.慢性浅表性胃炎患者胃黏膜组织ENO1表达水平升高与H.pylori感染有关;而在胃癌及癌前疾病病例中H.pylori感染对胃组织ENO1表达水平无显著影响。胃癌组织ENO1的表达水平显著高于癌旁组织，且ENO1主要定位于癌细胞的胞膜和胞质。 2.H.pylori感染可调节胃黏膜上皮细胞ENO1的表达，其表达水平与H.pylori感染量及感染持续时间有关;且正常胃黏膜上皮细胞与胃癌细胞在应对H.pylori感染时ENO1表达水平的变化不同。 3.胃黏膜上皮细胞中ENO1表达水平与cagA在细胞内的表达水平有关。