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以荔枝霜疫霉病菌(Peronophythora litchii)、黄瓜疫霉病菌(Phytophthora melonis)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)和香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)4号小种等5种重要的植物病原真菌为供试菌,对采自广西壮族自治区的31科39种传统药用植物的甲醇提取物对病原菌菌丝线性生长的抑菌活性进行离体测定,筛选杀菌植物。结果发现:在甲醇提取物质量浓度为10mg/ml时,八角枫(Alangium chinense)、梅叶冬青(Ilex asprella)、铁冬青(L rotunda)、一点血(Begonia wilsonii)、地胆草(Elephantopus scaber)、叶下珠(Phyllanthus urinaria)、石见穿(Salvia chinensia)、石香薷(Mosla chinensis)、牛尾菜(Smilax riparia)、金果榄(Tinospora capillipes)、走马胎(Ardisia gigantifolia)、石仙桃(Pholidota chinensis)、虎仗(Polygonum cuspidatum)、半边旗(Pterissemipinnata)、苦李根(Rhamnus crenatus)、黄根(Prismatomeris tetrandra)、三叉苦(枝叶)(Evodia lepta)、布渣叶(Microcos paniculata)和石油菜(Pilea cavaleriei)等19种植物样品对供试的5种植物病原真菌中的1种以上的抑菌率大于60%。对荔枝霜疫霉病菌抗菌率大于60%的有13种,其中:石香薷、一点血的抑菌率为100%,其次为金果榄和苦李根,其抑菌率分别为:96.00%和94.55%;对黄瓜疫霉病菌抗菌活性大于60%的有11种,其中:石香薷、八角枫、半边旗和金果榄的抑菌率分别是100%、93.88%、91.92%和90.32%;对水稻纹枯病菌抑菌率大于60%的有6种,其中活性最高的为石香薷,其抑菌率为100%,其次为黄根(80.00%)和三叉苦(69.03%);对香蕉炭疽病菌抗菌活性大于60%的有5种,其中活性最高的为石香薷,其抑菌率为100%,活性较高的还有苦李根(69.05%)和石仙桃(67.86%);对香蕉枯萎病菌抑菌活性大于60%的有4种,其中活性最高的为石香薷,其抑菌率为100%,其次分别是苦李根(73.58%),石仙桃(68.99%)和黄根(61.46%)。石香薷对供试的5种植物病原真菌的抑菌率都为100%,表现出较高和较广的抑菌活性,因此选择为目标植物进行抗菌化合物的进一步分离研究。
采用液一液分部萃取方法,根据极性从小到大的顺序,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯对石香薷甲醇提取物进行初步分离,并对各萃取部分进行活性跟踪测定。在石香薷各萃取物质量浓度为10mg/ml时,石油醚萃取物和氯仿萃取物对供试的5种植物病原真菌的抑菌率均为100%,乙酸乙酯萃取物对供试的2种低等真菌:荔枝霜疫霉菌和黄瓜疫霉菌的抑菌率都在80%以上。结果表明抗菌化合物分布在不同的萃取部分中。综合考虑,选择氯仿萃取物进行抗菌化合物的分离纯化。采用柱层析,薄层制备(TLC)和重结晶等方法对石香薷甲醇提取物的氯仿萃取物的抗菌化合物进行分离纯化,并采用核磁共振,质谱等方法对化合物进行结构鉴定。结果从石香薷甲醇提取物氯仿萃取物中分离纯化得到5个化合物:(1)B-谷甾醇,(2)齐敦果酸,(3)木犀草素,(4)2a-羟基乌苏酸和(5)B-胡萝卜苷,其中后4种化合物为首次在石香薷植物中分离得到。
对化合物的抑菌活性测定结果表明:齐敦果酸和木犀草素对供试的黄瓜疫霉菌,水稻纹枯菌,香蕉炭疽菌和香蕉枯萎菌均有抗菌活性,其中,在质量浓度为1mg/ml时,齐墩果酸对香蕉炭疽菌的抑菌率达到52.88%,木犀草素对黄瓜疫霉菌的抑菌率达到72.34%。