桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)为我国重要的一种水果害虫,对多种水果危害严重。目前,主要采用以化学防治为主的策略。由于杀虫剂大量使用,近年来该虫抗药性问题越来越明显。为有效治理该虫抗药性,围绕抗药性监测,及影响该虫药剂敏感性的因素这个主题,本文比较研究了点滴法、药膜法、圆筒滤纸法和饲喂法四种毒力测定方法的效果,并应用于田间种群抗药性监测:测定了多种类型杀虫剂对桔小实蝇敏感品系的毒力,建立了毒力敏感基线;研究了不同温度、饲养密度、测定密度、日龄、雌雄性别、寄主食料等条件下,桔小实蝇药剂敏感性的差异;运用半薄切片、透射电镜技术比较分析敏感品系与抗性品系在微观形态学方面的差异,同时,应用高效液相色谱法研究了高效氯氰菊酯对相对敏感品系与抗性品系表皮的穿透性。论文的结果对探索桔小实蝇抗药性产生机制,提出抗药性治理策略具有理论和实践意义。　　 1比较了杀虫剂对桔小实蝇的毒力测定方法应用药膜法、点滴法、圆筒滤纸法和饲喂法测定了敌百虫、高效氯氰菊酯和阿维菌素对桔小实蝇成虫的毒力。结果表明,不同的药剂所适用的毒力测定方法并不完全相同。4种方法均适用于敌百虫对桔小实蝇成虫的毒力测定;饲喂法不适用于高效氯氰菊酯;圆筒滤纸法不适用于阿维菌素。应用点滴法和药膜法测定了桔小实蝇广州种群对辛硫磷、敌百虫、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯氰菊酯、甲维盐、阿维菌素的抗性程度。药膜法所测得的桔小实蝇对拟除虫菊酯类农药的抗性倍数略低于点滴法。点滴法和药膜法的测定结果均能一致反映桔小实蝇田间种群对杀虫剂的抗性水平。　　 2建立了不同类型杀虫剂对桔小实蝇成虫触杀作用的毒力敏感基线用点滴法和药膜法测定了多种类型杀虫剂对桔小实蝇敏感品系成虫的触杀作用毒力,确定了敏感基线。点滴法测定结果表明,14种杀虫剂对桔小实蝇成虫24 h后的致死中量由小到大依次为甲维盐(1.20 ng/头)、阿维菌素(5.48 ng/头)、敌敌畏(11.33 ng/头)、高效氯氰菊酯(11.58 ng/头)、辛硫磷(14.04ng/头)、功夫(14.04ng/头)、氯氰菊酯(19.81 ng/头)、灭多威(63.52 ng/头)、敌百虫(94.84 ng/头)、吡虫啉(496.62 ng/头)、硫丹(616.55 ng/头)、啶虫脒(808.43 ng/头)、甲氰菊酯(942.53ng/头)、杀螟丹(10841.97 ng/头)。药膜法测定结果表明,8种杀虫剂对桔小实蝇成虫24 h后的致死中浓度由小到大依次为甲维盐(0.88 mg/L)、高效氯氰菊酯(1.86mg/L)、功夫(1.94 mg/L)、辛硫磷(2.05 mg/L)、氯氰菊酯(4.86 mg/L)、敌百虫(4.93 mg/L)、灭多威(7.38 mg/L)、阿维菌素(12.43 mg/L)。　　 3监测了桔小实蝇广州田间种群抗药性动态采用点滴法测定了桔小实蝇广州种群对敌百虫、高效氯氰菊酯、阿维菌素的抗性。结果表明,7月份桔小实蝇对敌百虫产生了低水平抗性,抗性倍数为3.57倍,抗性个体频率为74.00％;7～11月桔小实蝇对高效氯氰菊酯均产生了低水平抗性,10月抗性倍数和抗性个体频率较高,分别为6.23倍和44.00%;桔小实蝇对阿维菌素尚处于敏感阶段,各月份的抗性倍数、抗性个体频率之间无显著差异。　　 4阐明了多种因素对桔小实蝇药剂敏感性的影响规律本部分研究了温度、饲养密度、测定密度、日龄、性别和寄主食料对桔小实蝇药剂敏感性的影响,主要研究结果如下:　　 在15℃、20℃、25℃、30℃及35℃条件下测定敌百虫、高效氯氰菊酯和阿维菌素对桔小实蝇成虫的毒力。结果显示,敌百虫和阿维菌素对桔小实蝇的毒力随温度上升而增强,呈正温度效应。温度较高时,敌百虫对桔小实蝇的毒力显著升高。剂量为LC20时,温度对试虫对阿维菌素敏感性的影响不明显。在15℃～35℃温度范围内,处理剂量为LC20时,桔小实蝇对高效氯氰菊酯的药剂敏感性随温度的升高而降低,高效氯氰菊酯呈负温度效应;而处理剂量为LC80时,从死亡率来看各温度下毒力差异不显著。　　 随着饲养密度的降低,试虫对敌百虫的药剂敏感性降低;对高效氯氰菊酯和阿维菌素的药剂敏感性升高。敌百虫处理组LC50值与成虫体重呈极显著正相关;阿维菌素处理组LC50值与成虫体重呈极显著负相关;高效氯氰菊酯处理组LC50值与成虫体重没有显著相关关系。10粒/g～13粒/g之间的饲养密度可作为获得有代表性的毒力测定结果的饲养密度。　　 随着测定密度的增加,敌百虫处理组桔小实蝇成虫的死亡率显著降低,药剂敏感性降低;高效氯氰菊酯处理组桔小实蝇死亡率与测定密度的关系符合S曲线,10头/瓶～50头/瓶,死亡率趋于稳定;阿维菌素处理组测定密度为15头/瓶～45头/瓶时,桔小实蝇死亡率略有上升,药剂敏感性升高。结果表明,药膜法最好控制每瓶的试虫数为10头、15头。　　 用药膜法测定敌百虫、高效氯氰菊酯对不同日龄、雌雄性别桔小实蝇成虫的毒力。结果表明:4日龄的桔小实蝇对敌百虫的敏感性最强,校正死亡率约为56.67%;对高效氯氰菊酯的敏感性最弱,校正死亡率约为46.67%,说明4日龄是一个与其它日龄校正死亡率差异最大的龄期,选取4日龄做为生物测定的龄期比较合适。雌虫、雄虫对敌百虫的药剂敏感性差异不显著,而对高效氯氰菊酯雌虫的药剂敏感性高于雄虫。因此应控制生物测定时的日龄,以及雌雄虫比例。　　 取食不同寄主食料的桔小实蝇对敌百虫和高效氯氰菊酯的敏感性发生了变化。结果表明:桔小实蝇对敌百虫的敏感性以取食香蕉的最大,其LC50值为1.61 mg/L,其它依次为苹果、杨桃、饲料、梨、芒果、番石榴、桔子、木瓜。试虫对高效氯氰菊酯的药剂敏感性以取食桔子的最大,其LC50值为1.12 mg/L,其它依次为香蕉、木瓜、饲料、番石榴、梨、苹果、杨桃、芒果。桔小实蝇对敌百虫和高效氯氰菊酯的敏感性在部分的寄主食料之间差异显著。桔小实蝇对敌百虫的敏感性与体重呈负相关,而对高效氯氰菊酯的敏感性与体重不具有相关性。　　 5研究明确了桔小实蝇抗性品系和相对敏感品系幼虫体壁结构差异,及高效氯氰菊酯对两品系的表皮穿透能力利用半薄切片对桔小实蝇相对敏感品系和抗性品系3龄幼虫组织形态差异进行观察。结果表明相对敏感品系、敌百虫抗性品系和高效氯氰菊酯抗性品系幼虫体壁表皮的厚度约为19.36μm、19.76μm、25.96μm,抗性品系所含的脂肪体比相对敏感品系多。透射电镜观察了桔小实蝇相对敏感品系和抗性品系3龄幼虫体壁结构差异。结果表明敌百虫抗性品系体壁的几丁质片层数(89层)和高效氯氰菊酯抗性品系体壁的几丁质片层数(94层)比相对敏感品系的几丁质片层数(76层)多;几丁质片层排列比较紧致;抗性品系皮细胞的间隙比敏感品系多。采用高效液相色谱法,对高效氯氰菊酯对相对敏感品系和抗性品系3龄幼虫的表皮穿透能力进行了研究。结果表明,1 h内,约有1.34 ng药剂进入相对敏感品系体内,表皮穿透率约为87.01%;约有2.37 ng药剂进入抗性品系体内,表皮穿透率约为24.04%,说明抗性品系表皮对药剂具有抵抗穿透作用。1～24 h内相对敏感品系对高效氯氰菊酯的降解量约为0.84 ng,降解率约为62.69%;抗性品系对高效氯氰菊酯的降解量约为1.76 ng,降解率约为74.26%,说明抗性品系具有代谢抗性。