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第一部分实验性自身免疫性神经炎大鼠模型的制备 目的：实验性自身免疫性神经炎（experimental autoimmune neuritis, EAN）动物是研究人类急性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病（acute inflammatory demyelinating polyneuropathy, AIDP）的经典模型。本部分拟通过免疫诱导的方法，建立EAN大鼠模型。 方法：Lewis大鼠皮下局部注射周围神经髓鞘蛋白P253-78与完全弗氏佐剂的混合乳液免疫法（P2/CFA）诱导产生EAN。通过临床症状评分、体重变化以及组织病理学染色等方法，观察EAN的病程特点，评估建模是否成功。 结果：免疫后第10.2±1.3天大鼠出现EAN临床症状。免疫后第15天达到EAN疾病高峰期，此时临床症状评分为6.6±0.6。大鼠从免疫后第17天开始恢复，直到第20天临床症状完全消失。在EAN疾病高峰期，坐骨神经出现明显脱髓鞘改变同时伴有大量细胞浸润。 结论：周围神经髓鞘蛋白P253-78能成功诱导大鼠EAN，成功率100％，该模型的建立为后续的实验打下了基础。 第二部分芳香烃受体在EAN大鼠坐骨神经中的表达 目的：研究芳香烃受体（aryl hydrocarbon receptor, AhR）在EAN大鼠坐骨神经中的表达，从而探讨AhR在自身免疫性神经炎中的作用。 方法：运用免疫组织化学染色（含双重染色）的方法，检测 AhR在EAN大鼠坐骨神经中的表达，明确AhR+细胞的来源和分布。 结果：在大鼠EAN疾病高峰期的坐骨神经组织中，AhR+细胞的数目为：205.9±10.3/mm2，浸润集中发生在血管周围，其细胞的主要来源是T细胞（59.1±4.3%）和巨噬细胞（29.8±3.4%）。 结论：AhR+细胞在EAN大鼠坐骨神经的聚集与疾病的严重程度呈正相关；AhR可能被内源性配体激活，参与到EAN的发生和发展过程。 第三部分 VAF347激活AhR对EAN的作用及机制研究 目的：研究AhR水溶性配体VAF347治疗EAN大鼠的疗效，分析VAF347激活AhR在自身免疫性神经炎中的作用和机制。 方法：采用免疫组化、流式细胞技术以及实时荧光定量PCR等方法，观察VAF347治疗EAN大鼠前后坐骨神经AhR+、IL-17+、Foxp3+、CD3+和ED1+细胞数目的变化，坐骨神经脱髓鞘情况以及外周血和腹股沟淋巴结IL-17、Foxp3、IFN-γ、TGF-β1、IL-4和IL-10的表达变化。 结果：EAN大鼠经VAF347治疗后临床症状显著改善，评分下降，坐骨神经脱髓鞘程度明显减轻。VAF347激活 AhR后，坐骨神经局部AhR+、IL-17+及CD3+细胞数和比例明显下降，ED1+和Foxp3+细胞数虽然降低但其比例上升。VAF347治疗后，外周血和淋巴结IL-17+细胞比例下降，而Foxp3+细胞比例明显上升。同时VAF347治疗使淋巴结IL-17和IFN-γmRNA表达明显降低，TGF-β1和Foxp3表达显著增加，而IL-4和IL-10的表达在治疗前后未发生明显变化。 结论：VAF347激活AhR明显减轻全身炎症反应，改善EAN临床症状，减轻坐骨神经炎症细胞的浸润及脱髓鞘，为自身免疫性神经炎的治疗提供了新的思路。VAF347激活AhR可能通过TGF-β1通路调节Foxp3+细胞，从而在EAN大鼠中发挥抗炎作用。 第四部分 TGF-β1信号通路在VAF347激活AhR治疗EAN中的作用 目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）信号通路在VAF347激活AhR治疗EAN中的作用。 方法：采用可溶性转化生长因子-β1II型受体（soluble transforming growth factor-βl receptor II, sTβRII）抑制TGF-β1信号通路，通过移植经VAF347治疗的EAN大鼠CD4+T细胞，借助EAN临床评分和淋巴结炎症因子的表达来观察P2/CFA能否诱发EAN病程。 结果：与CD4+Control组相比，CD4+VAF347组临床症状评分明显降低，病程缩短（P<0.05），iNOS、TNF-α、IL-1β炎症因子mRNA表达显著下降而TGF-β1表达显著上升（P<0.01）；sTβRII+CD4+VAF347组临床症状评分以及 iNOS、TNF-α、IL-1β和 TGF-β1水平与CD4+Control组无明显差异。 结论：在EAN大鼠模型中，VAF347激活AhR，促进调节性T细胞分化，挥发免疫抑制作用是通过TGF-β1途径。