目的：探讨应用阿魏酸钠、β-巯基乙醇和联合诱导三种不同诱导方法对体外分离培养的人和大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为神经元样细胞,并比较不同诱导方法的诱导率,以获得一种较好的诱导方案,为骨髓间充质干细胞的临床应用提供更充足的实验依据和技术方法。 方法：采用全骨髓培养法从正常成人和大鼠的骨髓中分离获取骨髓间充质干细胞,体外培养、扩增、纯化后,取第三代生长状态良好的骨髓间充质干细胞,分三组对其进行诱导：①β-巯基乙醇组,②阿魏酸钠组,③β-巯基乙醇与阿魏酸钠联合诱导组,同时设对照组。观察各组诱导后细胞的形态学改变,并与对照组细胞形态进行对比；应用免疫细胞化学法检测诱导后细胞的神经元特异性烯醇化酶、神经微丝蛋白-M和胶质纤维酸性蛋白的表达,并比较不同诱导方法的诱导率；用RT-PCR检测各组细胞诱导后细胞神经元特异性烯醇化酶、神经微丝蛋白-M和胶质纤维酸性蛋白mRNA的表达,并与对照组进行比较。 结果：(1)从人和大鼠骨髓中所获得的骨髓间充质干细胞可保持较高的增殖生长能力。(2)实验组：①细胞在24小时的预诱导中形态无明显变化,正式诱导后3-6h细胞胞体开始向胞核收缩,呈圆形,并开始长出1-3个细胞突起；12小时后突起不断延长,出现2-3级突起并相互交错；24小时后胞体圆形,伸出的2-3级突起相互交织成网状。②免疫细胞化学结果显示：三种不同诱导方法诱导人和大鼠骨髓间充质干细胞后神经元特异性稀醇化酶和神经微丝蛋白-M的阳性表达率均较对照组明显增高,且差异有统计学意(P<0.01),胶质纤维酸性蛋白表达为阴性；(3)对照组：细胞在预诱导和正式诱导过程中细胞形态均无明显变化,免疫细胞化学及RT-PCR的方法鉴定结果显示神经元特异性稀醇化酶、神经微丝蛋白-M、胶质纤维酸性蛋白在蛋白质及m-RNA水平表达均为阴性。 结论：(1)从人和大鼠骨髓中所获得的骨髓间充质干细胞均可以在体外扩增、培养,并可向神经元样细胞方向诱导分化。阿魏酸钠、β-巯基乙醇能促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化。(2)联合诱导组诱导效率高于单独诱导组,提示阿魏酸钠与β-巯基乙醇可能具有协同诱导作用,本研究首次证实了阿魏酸钠与β-巯基乙醇两者联合诱导可以促进BMSCs向神经元样细胞分化并可获得较好的效果。