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灰树花菌种经液体深层发酵生产菌丝体来提取多糖,本文研究了各营养因子及发酵条件对灰树花发酵的影响,并对其进行了初步优化,为后期实验获得大量菌丝体。获得优化培养基的组成为:葡萄糖2%,蔗糖2%,蛋白胨0.6%,豆油0.1%,KH2PO4 0.05%,MgSO4 0.05%,pH6.0。菌丝体经热水浸提后,浓缩,3倍体积醇沉提取灰树花粗多糖,其中主要研究了热水浸提过程中提取温度、料液比、提取时间、醇析浓度对提取得率的影响,获得最佳提取条件是提取温度为80℃,料水比为1:30,提取时间为4h。然后经sevag法脱蛋白,由于大分子量、溶解性差的杂多糖会在较稀溶剂浓度条件下首先沉淀出来,然后是糖蛋白,故采用分级醇沉法去除这部分杂质,使灰树花粗多糖得到初步纯化,得到一级醇沉浓度是50%,二级醇沉浓度为80%。经初步纯化的灰树花多糖经过离子纤维素DEAE-纤维素52进行离子交换层析,获得两种组分PGF-a和PGF-b,收集洗脱液后,经SephadexG-25脱盐后浓缩,再分别经SepheracylS-400和SepheracylS-200凝胶层析进行分离纯化,结果表明PGF-a和PGF-b洗脱峰均为单一对称峰,又同时通过采用GPC对两种组分PGF-a和PGF-b的分子量分布范围进行分析,测得样品PGF-a为含相对平均分子量不均一的混合物;样品PGF-b为相对平均分子量比较均一的组分,所以选用其中分子量比较均一的PGF-b多糖进行降解研究。本实验采用自由基法降解多糖,降解后的多糖经SephadexG-75凝胶柱分离纯化后获得两种组分Ⅰ和Ⅱ,两者浓缩干燥后,做体内抗肿瘤和抗氧化的活性实验,结果表明PGF-b、PGF-bⅠ和PGF-bⅡ均有一定的抑瘤作用,其中PGF-bⅡ的抗肿瘤抑制作用和清除自由基的能力比较好。