油菜是世界四大油料作物之一,对世界经济以及人类生存意义重大。随着油菜基因组测序的完成,油菜功能基因组学的研究也逐步提上日程。开展油菜功能基因组学研究对揭示油菜基因功能、器官发生和发育及重要农艺性状的遗传基础有重要意义。进行功能基因组学研究最直接有效的方式是构建大规模的突变群体,用T-DNA或者转座元件创造插入突变体是进行基因功能研究的有效手段之一。Tnt1是一个复制-粘贴型的转座子,在胁迫条件下会发生复制-粘贴型的转座,因此转基因植株通过组织培养可以获得更多突变体。本研究中,我们以烟草反转录转座子Tnt1转化甘蓝型油菜品种Westar来创建油菜突变体库,并对T1代转基因植株进行了突变表型观察。通过Tail-PCR以及Adapter-PCR方法分离T0代转基因植株中Tnt1插入到油菜的侧翼序列。我们还将部分转基因植株与黄籽沙逊进行杂交,再与黄籽沙逊回交,期望获得含有Tnt1的白菜型(AA基因组)后代,主要研究结果如下:1.利用农杆菌介导的油菜遗传转化方法将载体Tnk23转化到甘蓝型油菜Westar中,共获得转基因植株201株,经鉴定阳性植株有112株,阳性率为56%。2.将收获的T0代编号为T0-7和T0-15的种子再次进行植物组织培养,其中T1z-7获得的阳性再生植株为103株,阳性率为88%;T1z-15获得的阳性再生植株为135株,阳性率为97%。3.采用Tail-PCR以及Adapter-PCR的方法分离到Tnt1的侧翼序列57条,其中34条侧翼序列能准确定位到油菜染色体上,非重复序列有13条。并对Tnt1插入到基因内部的T1代植株进行插入位点的验证以及基因表达的研究。4.T1代转基因植株中观察了叶片、花器官发育等性状的突变表型。5.通过远源杂交获得携带Tnt1的白菜渗入材料。2016春季以编号为T1-15,T1-33和T1-96的转基因油菜为母本与黄籽沙逊杂交,2016年5月收获F1代种子。以黄籽沙逊(2n=20,AA)为轮回亲本,与转基因甘蓝型油菜(2n=38,AACC)杂交后连续回交,希望得到携带Tnt1染色体片段的重组型AA的白菜品种。