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该实验以卵白蛋白致敏豚鼠建立哮喘模型,研究了孟鲁司特对哮喘豚鼠肺组织炎症的影响,并从多个方面、不同水平探讨了孟鲁司特拮抗哮喘豚鼠气道炎症的机制.主要内容概括如下:1.孟鲁司特对哮喘豚鼠肺血管通透性的影响该实验旨在研究孟鲁司特对哮喘豚鼠肺血管通透性的影响.以5﹪卵白蛋白腹腔注射和后肢肌肉注射致敏豚鼠,两周后用1﹪的卵白蛋白雾化吸入引喘,引喘前2小时各组豚鼠管喂不同剂量的孟鲁司特,正常对照组和模型组管喂相应量的羧甲基纤维素钠.通过伊文思蓝分光光度法测定肺血管通透性的变化.大体观察肺组织可见,正常对照组豚鼠肺组织轻度蓝染;模型组肺组织蓝染明显;MK各剂量组肺组织有不同程度的蓝染,但较模型组为轻,且剂量越大蓝染越轻.2.孟鲁司特对哮喘豚鼠气道粘液分泌及肺组织病理形态学和NF-κ B活化的影响引喘第一天观察各组动物引喘潜伏期和跌倒率(最长观察6min,超过6min按6min计时).该实验通过咔唑比色法检测气道粘液分泌的情况;采用HE染色观察了豚鼠肺组织炎症的变化;利用免疫组织化学染色法检测了豚鼠肺组织NF-κ B的活化.结果表明,孟鲁司特显著延长致敏豚鼠引喘潜伏期,降低引喘跌倒率.3.盂鲁司特对哮喘相关炎症细胞及细胞因子和趋化因子的影响哮喘发病过程十分复杂,有多种细胞和细胞因子及炎症介质参与,其中起核心作用的是EOS.Eotaxin是最重要的嗜酸性粒细胞趋化因子.IL-10作为一种抗炎因子,在拮抗哮喘发病过程中发挥举足轻重的作用.该实验通过密度梯度离心法分离并计数了各组豚鼠肺泡灌洗液(BALF)中正常密度嗜酸性粒细胞(NEOS)和低密度嗜酸性粒细胞(HEOS)的数量;采用双抗体夹心-ABC ELISA法检测了BALF中细胞因子IL-10和趋化因子Eotaxin的水平.4.孟鲁司特对哮喘豚鼠气道EOS凋亡及Fas mRNA表达的影响凋亡细胞细胞膜完整,可被巨噬细胞完整吞噬,不释放胞内炎症介质,不引起炎症过程,有利于炎症控制.该实验通过TUNEL法检测了哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞的凋亡情况,并通过RT-PCR检测其Fas mRNA的表达.综上所述,孟鲁司特能够有效拮抗哮喘豚鼠气道炎症,延长引喘潜伏期和降低跌倒率.其抗炎作用可能与以下途径有关:(1)通过降低肺血管通透性和抑制气道粘液高分泌减轻哮喘豚鼠肺组织渗出、水肿和气道阻塞.(2)通过升高抗炎因子IL-10的水平,抑制NF-κ B的活化减轻肺组织炎症.(3)通过降低肺内嗜酸性粒细胞趋化因子Eotaxin的含量,减少EOS在肺组织中的趋化聚集,从而减轻气道嗜酸性粒细胞浸润.(4)通过增强气道嗜酸性粒细胞表达Fas促进其凋亡,缓解气道嗜酸性粒细胞性炎症.