毛木耳是一种是药用价值较高的胶质担子菌,是我国传统出口商品之一。目前毛木耳菌种退化严重、病虫害严重,产量和品质有所下降,但有关毛木耳的优良杂交菌株选育方研究极少。本实验采用多孢杂交的方法,以亲缘关系较远、农艺性状互补的红褐色菌株毛木耳MZP01和毛木耳白色变异菌株MZP03为亲本进行多孢杂交,主要研究如下:将收集到的28株毛木耳菌株按拮抗进行分类,根据拮抗结果筛选出12株毛木耳菌株,然后进行ITS序列分析,建立系统发育树,栽培出菇,通过对其农艺性状的观察,最后筛选出亲缘关系较远,产量高、耳片形态佳、颜色差异大的2个毛木耳菌株用作亲本,即MZP01和MZP03。首先对亲本孢子收集、萌发时间及保藏进行了研究,确保育种工作的随时进行。然后对亲本孢子萌发时间的探究,确定了两株亲本菌株的孢子萌发的具体时间,使其孢子可以在同一时间萌发,加大孢子的随机结合的几率,使其F1代杂交种表现型更丰富。同时针对两种多孢杂交方法的比较(液体培养基多孢杂交、固体培养基多孢杂交),得到更加优化的多孢杂交育种方法。结果发现,使用液体培养基进行多孢杂交,F1代杂交种表现型更丰富,出现了5株粉色毛木耳菌株。通过对F1代MZF02菌株进行自交,得到的F2代子实体分别出现粉色菌株,白色菌株,红褐色菌株,通过其性状分离情况与亲本自交后代的对比,粉色毛木耳菌株为亲本MZP01和MZP03的杂交后代。通过对F1代杂交种的拮抗实验、菌丝分解木屑速度、耳片厚度、耳片性状、百片重、产量、颜色等农艺性状指标观察对比发现:5株粉色毛木耳杂交种中MZF02与MZF05各方面均优于亲本和其他杂交种,可以进行下一步复筛。