【摘 要】
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脱落酸(Abscisic Acid,ABA)作为五大类经典植物激素之一,调控植物生长发育的多个方面,如植物胚胎发生、种子萌发与休眠、营养生长、果实成熟等。同时在植物应对非生物胁迫以
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脱落酸(Abscisic Acid,ABA)作为五大类经典植物激素之一,调控植物生长发育的多个方面,如植物胚胎发生、种子萌发与休眠、营养生长、果实成熟等。同时在植物应对非生物胁迫以及生物胁迫中,脱落酸也发挥着重要的调控作用。有报道称,BIC1和BIC2在拟南芥隐花色素CRY1和CRY2的光激活和失活中发挥作用。但我们通过转录组测序,寻找功能未知的ABA响应基因时发现BIC1和BIC2的表达受ABA调控。本研究系统探究了BIC1和BIC2在调控拟南芥对ABA响应的作用。首先,我们通过RT-PCR检测这两个基因的表达,发现它们确实受ABA诱导。通过RT-PCR检测其在植物不同部位的表达,发现BIC1在茎生叶、花、荚果中的表达相对较高,BIC2在拟南芥根、茎、莲座叶、茎生叶、花、荚果部位均具有较高表达。通过构建GFP-BIC1和GFP-BIC2融合蛋白表达载体进行蛋白亚细胞定位分析,发现BIC1在核中有定位,BIC2是核定位蛋白。构建GD-BIC1和GD-BIC2融合蛋白进行原生质体瞬时转染,发现BIC1和BIC2具有转录激活活性。但BIC2转录激活活性高于BIC1。为了进一步探究BIC1和BIC2在植物对ABA响应中的作用。我们通过筛选获得这两个基因的T-DNA插入突变体材料bic1-1和bic2-1;同时也构建了BIC1和BIC2的CRISPR/Cas9载体,基因编辑获得BIC1和BIC2的单突变体材料bic1-2和bic2-2;以及双突变体bic1 bic2-1和bic1 bic2-2;通过构建BIC1和BIC2过表达载体进行植物转化,筛选获得BIC1和BIC2过表达植株。通过研究所获得的植物材料在种子萌发、绿苗率、下胚轴等方面对ABA的响应,探究了BIC1和BIC2调控拟南芥对ABA响应中的作用。结果显BIC1和BIC2的过表达转基因植株对ABA敏感性升高,说明BIC1和BIC2正向调控植物ABA的响应。
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