三角帆蚌与相似种的RAPD鉴别及其软体组织的质量评价体系的研究

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三角帆蚌的软体部分含有丰富的营养物质:多糖、蛋白质、必需氨基酸含量均较高,含有丰富的钙、磷、铁、锰及多种维生素、脂肪含量低,具有很好的药用和食用价值,尤其在免疫调节和抗肿瘤方面的生物活性已成为当前研究的热点。但到目前为止,淡水蚌类作为食用与具有较高药用价值的软体动物除贝壳的性状外,如何鉴别不同种软体组织以及如何评价其质量的优劣仍处于空白研究状态,本课题致力于养殖淡水珍珠的软体双壳贝类动物三角帆蚌[Hyriopsis cumingii(Lea)]在养殖珍珠并剥取珍珠后的母体即三角帆蚌软体的RAPD鉴别及其质量评价体系的研究。主要内容包括以下几个部分:1.文献研究。查阅有关淡水蚌的研究文献,了解珠蚌的历史沿革和现代研究进展,包括珠蚌的各个部位蚌肉、贝壳及其分泌物珍珠的来源、母体生活环境、性状、性味功效、采集与加工、古医典论摘、古今效方、化学成分和药理药效等方面,同时参考多糖药理作用的研究进展,为实验部分的工作奠定文献资料的基础。2.三角帆蚌及其相似种的RAPD鉴别。应用分子标记技术直接根据三角帆蚌及其相似种的遗传本质DNA的多态特征,用30个随机引物对三角帆蚌及其相似种进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,最终筛选出2个引物,分别能扩增出1-5条大小不等的片段,片段长度在250-1000 bp之间,表明应用RAPD技术能对三角帆蚌及其相似种特有的DNA片段进行鉴别,为三角帆蚌及其相似种的软体组织鉴别提供方法和技术。3.三角帆蚌软体组织的质量评价体系的研究。通过对三角帆蚌软体组织、养殖池中水和沉积物中重金属含量的比较,发现作为底栖生物的三角帆蚌其软体组织中重金属铅和总砷的含量均超出国家标准,分别为0.54mg/kg和2.09mg/kg,但经过煎煮醇沉后得到具有免疫调节作用的粗多糖部位其重金属含量为0.07mg/kg和0.24mg/kg均符合国家标准。研究结果表明三角帆蚌软体组织对重金属有很强的富集能力,而有害重金属铅、总砷、镉、汞主要来源于养殖池底部沉积物。同时对三角帆蚌软体组织的水分、灰分、浸出物、总糖和水溶性蛋白进行了含量测定并以总糖和水溶性蛋白的含量考察了产地、采收季节、加工炮制的影响。研究表明带壳的三角帆蚌外观性状与其他品种背角无齿蚌、猪耳丽蚌比较具有明显的可鉴别外观特征。其软体组织含水分82.7%、灰分1.71%、酸不溶灰分0.4%、水浸出物9.29%、醇浸出物4.39%、总糖4.74%、水溶性蛋白1.93%。其软体组织最佳干燥工艺为:在摊层密度为2.5kg/m~2,温度为90℃,连续干燥2小时,测得三角帆蚌干燥的软体组织中总多糖含量为21.26%、水溶性蛋白质含量为10.7%。南京地区养殖的三角帆蚌中总糖含量较高,一般可在3-4月份采收。课题研究结果为三角帆蚌软体作为药用原料,提供了评价质量的基础科学依据。
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