目的：（1）通过观察层粘连蛋白对角膜内皮细胞骨架及细胞增殖性的影响，探讨细胞骨架的改变与细胞增殖的相关性；（2）研究层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用对兔角膜内皮细胞增殖性的影响；（3）通过观察体外培养猫角膜内皮组织的形态结构，探寻角膜组织体外构建的最佳载体材料及方法。 方法：（1）分别在基础培养液和添加层粘连蛋白的培养液中培养内皮细胞36h，流式细胞技术检测细胞周期，考马斯亮蓝细胞骨架染色，并分析细胞增殖及细胞骨架改变的相关性；（2）倒置显微镜观察细胞形态及数目变化，计数0、12h、24h、36h、48h的细胞数目并绘制细胞生长曲线，流式细胞技术检测细胞周期；（3）用组织培养的方法，以保留后弹力膜的脱水猪角膜基质为载体，体外重建猫角膜内皮组织，并观察其形态结构。 结果：（1）层粘连蛋白组处于G₂～M期细胞比例较对照组显著提高，Go～G₁期细胞比例显著下降，提示层粘连蛋白促进内皮细胞DNA合成，及细胞分裂增殖；光镜下，对照组细胞分布成团状，细胞密度较低，细胞间连接紧密，细胞内微丝结成网状，细胞核大小一致；与对照组相比，层粘连蛋白组细胞生长旺盛，细胞密度高，向周边伸出大量板状及丝状伪足，细胞内微丝增多、拉长、集结成束，伸入伪足中，细胞核形状大小不一致；（2）倒置显微镜观察及细胞生长曲线显示，各组细胞数目随时间增加而明显增多，各实验组较对照组增生显著，EGF和LN联合应用组各时间点细胞数目最高；实验组处于S期和G₂～M期细胞数目增加，Go～G₁期细胞数目减少；提示EGF、LN单独及联合应用均可促进细胞增殖，但尚不能认为二者有交互作用；（3）倒置显微镜下，组织培养的猫角膜内皮细胞排列成密集的单层，细胞间连接紧密；组织学观察发现，培养的猫角膜内皮细胞形成完整的内皮层，贴附于脱水基质的后弹力膜上，与正常的角膜内皮组织结构相似；扫描电镜下，组织培养的猫角膜内皮细胞间紧密镶嵌排列，可见某些细胞呈近似六边形排列，细胞大小不甚一致，胞核清晰。角膜内皮细胞体外增殖性研究及组织体外构建切相关;（2）层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用都可明显促进角膜内皮细胞分裂增殖，但尚不能认为联合应用有协同作用;（3）以脱水猪角膜基质为载体，体外可重建猫角膜内皮组织，其形态结构近似于正常角膜内皮组织。