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目的：研究人角膜缘微环境细胞（limbal niche cells, LNC）对兔碱烧伤角膜缘干细胞缺乏（limbal stem cell deficiency, LSCD）的治疗效果。 方法：⑴采用眼库来源人角膜缘组织，胶原酶A消化分离LNC， DF-12培养基、Matrigel包被塑料培养板，体外培养人LNC，传代4-6代细胞用于研究。⑵从人的角膜缘组织中分离培养人角膜缘微环境细胞(LNC)，以人骨髓来源的间充质干细胞（Bone marrow-derived mesenchymal stem cells，BMMSC）为对照，采用流式细胞技术和荧光定量实时PCR技术检测其CD90，CD105，CD73及SCF（stem cell factor,干细胞因子）等干细胞标志物表达情况。⑶用1mol/L氢氧化钠溶液碱烧伤兔角膜，建立兔角膜缘干细胞缺乏模型。⑷采用活体荧光标记法标记人角膜缘微环境细胞（LNC）和人骨髓来源的间充质干细胞（BMMSC)，进行结膜下注射移植。⑸将30只兔随机分为空白对照组、BMMSC组、LNC组3组，每组10只，观察角膜情况的变化，采用裂隙灯显微镜眼前段照相、角膜荧光素钠染色、角结膜印记细胞学检查评价LSCD严重程度。 结果：①成功分离和培养LNC。②流式细胞技术结果显示：96.73％的LNC表达CD90，88.71%的LNC表达CD105，95.02%的LNC表达CD73，11.06%的LNC表达SCF；而98.61%的BMMSC表达CD90，92.31%的BMMSC表达CD105，98.09%的BMMSC表达CD73，3.14%的BMMSC表达 SCF。荧光定量实时PCR结果从mRNA水平显示：LNC和BMMSC细胞内表达CD90,CD73,CD105和SCF的含量无明显差别（P>0.05），而LNC细胞中vimentin,SOX2和POU5F的mRNA含量明显高于BMMSC细胞（P<0.05）。③碱烧伤后可见兔角膜混浊、上皮缺损、新生血管长入、印迹细胞学显示 PAS(+)，成功建立兔角膜缘干细胞缺乏模型。④荧光标记结果显示结膜下移植的LNC和BMMSC在移植后4周有向角膜迁移的趋势。(5)30只兔中有12只完成3个月实验，分别为空白对照组3只、BMMSC组5只、LNC组4只，在此基础上进行分析：通过角膜混浊程度、角膜荧光素钠染色评分的数据结果显示BMMSC与空白对照组比较有统计学差异（P<0.05）、LNC组与空白对照组比较有统计学差异（P<0.05）、BMMSC组与LNC组比较没有统计学差异（P>0.05）；通过角膜新生血管面积的数据结果显示BMMSC组、LNC组和空白对照组比较均没有统计学差异（P>0.05）；通过印记细胞密度的数据结果显示LNC组与空白对照组，BMMSC组与空白对照组，LNC组与BMMSC组均有统计学差异（P<0.05）。 结论：球结膜下注射移植人角膜缘微环境细胞（LNC）对兔碱烧伤角膜缘干细胞缺乏（LSCD）有一定的治疗效果。