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目的:本研究通过将纤维素分解菌菌群与不同发酵类型乳酸菌(LAB)作为复合菌剂发酵青贮玉米,以期利用微生物间的协同作用提质降耗。方法:首先采用响应曲面优化法优化发酵菌剂比例和剂量。然后按照优化结果进行青贮玉米发酵,共设计3类发酵处理组合,第1类:对照处理(K),2种同质型LAB按1:1混合(T),纤维素分解菌群+T(TX);第2类:对照处理(K),异质型LAB(Y),纤维素分解菌群+Y(YX);第3类:对照处理(K),同+异质型LAB(TY),纤维素分解菌群+TY(TYX),其中同质型LAB为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,ACCC 11016)和戊糖片球菌(Pediococcus acidilactici,ACCC 05481)(添加量1:1,5×105 cfu/g),异质性LAB为布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri,CICC 20293)(添加量5×105 cfu/g),纤维素分解菌群为黑曲霉(Aspergillus niger,ACCC 30134)、绿色木霉(Trichoderma viride,ACCC 30595)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,ACCC 19374)(添加量2:1:1,0.3%)。通过观测不同处理在青贮发酵(60 d内)和开窖过程中(10 d内)主要微生物、发酵产物、营养物质、产酶规律及损失规律,以及有氧稳定和瘤胃半体外消化分析。主要得到以下结果。结果:(1)发酵期间,各发酵处理和发酵时间均显著影响4类微生物数量。开窖时,纤维素分解菌与各发酵类型LAB复合添加的4类微生物数量均明显高于单独添加各发酵类型LAB的微生物数量。纤维素分解菌与异、同+异质型LAB复合发酵未能显著影响乙醇含量,且各发酵处理未能显著影响乙酸含量,其余各发酵处理均能显著影响青贮玉米的发酵特征指标。除了纤维素分解菌与同+异质型LAB复合未能显著影响半纤维素含量,其余各发酵处理均能显著影响青贮玉米的各营养物质指标。纤维素分解菌与异、同+异质型LAB复合可显著影响产半纤维素酶的活性。开窖后,各发酵处理均能显著影响酵母菌和霉菌数量,且开窖天数显著影响LAB、酵母菌和霉菌数量。纤维素分解菌与同、同+异质型LAB复合可影响各发酵特征物质含量(除可溶性糖、乳酸和乙酸含量),而纤维素分解菌与异质型LAB复合可显著影响可溶性糖和乙酸含量。各发酵处理均可显著影响青贮产CO2含量,但未能影响其有氧稳定时间。纤维素分解菌与同/异质型LAB复合发酵均显著影响干物质、酸性洗涤木质素和半纤维素含量,而与同+异质型LAB复合发酵时,主要影响中性洗涤纤维、粗纤维和粗脂肪含量。除纤维素分解菌与同+异质型LAB复合对淀粉酶活性无显著影响外,其余处理组合对发酵和开窖后淀粉酶活性均有显著影响。(2)本研究全部鉴定出的菌种可分为13个属51种,分别为乳酸杆菌属(Lactobacillus sp.),柠檬酸杆菌属(Citrobacter sp.),明串珠菌属(Leuconostoc sp.),大肠杆菌属(Escherichia coli sp.)和大肠埃希氏菌属(Escherichia sp.),克雷伯氏菌属(Klebsiella sp.),不粘柄菌属(Asticcacaulis sp.),泛菌属(Pantoea sp.),脂杆菌(Obesumbacterium sp.),沙雷氏菌属(Serratia sp.),沙门氏菌(Salmonella sp.),志贺氏杆菌属(Shigella sp.),西地西菌属(Cedecea sp.)。(3)发酵期间,随发酵时间好氧细菌数量变化的最优拟合模型为:Polynomial模型,LAB为一元线性模型,酵母菌为Allometric模型,霉菌为Logistic模型。pH主要受酵母菌和霉菌协同作用影响;乳酸、粗蛋白、粗灰分含量以及半纤维素酶活性主要受LAB和霉菌协同作用影响;干物质、淀粉、酸性洗涤木质素、乙酸、铵态氮含量及铵态氮/总氮主要受LAB影响;乙醇含量主要受好氧细菌和酵母菌协同作用影响;粗脂肪含量主要受酵母菌和霉菌协同作用影响。提高半纤维酶活性可显著降低可溶性糖、淀粉和酸性洗涤木质素含量,提高淀粉酶活性可显著增加可溶性糖、淀粉、酸性洗涤木质素、半纤维素含量,降低粗纤维含量。开窖后,随开窖时间好氧数量变化的最优模型为:Gauss模型,LAB和酵母菌均为Logistic模型,霉菌为Allometric模型。乙酸含量和半纤维素酶活性主要受好氧细菌影响,干物质含量主要受酵母菌数量影响,粗蛋白含量主要受霉菌数量影响,粗脂肪含量主要受LAB影响,4类微生物协同作用可显著影响中性洗涤纤维、粗纤维、粗灰分、铵态氮含量以及铵态氮/总氮和pH。提高半纤维酶活性可显著降低淀粉、中/酸性洗涤纤维和粗纤维含量。(4)纤维素分解菌与同质型LAB复合发酵显著影响酸性洗涤纤维降解率(ADFD)和有机质降解率(OMD)。纤维素分解菌与同+异质型LAB复合发酵显著影响干物质降解率(DMD)、ADFD、OMD。纤维素分解菌与同质型LAB复合发酵显著影响有机物降解特征参数a(快速降解部分)、b(慢速降解部分)和a+b(潜在降解部分)。纤维素分解菌与异质型LAB复合发酵显著影响干物质的有效降解率(ED)以及NDF降解特征参数c(慢速降解部分的降解率)。纤维素分解菌与同+异质型LAB复合发酵显著影响干物质降解特征参数a、b、a+b和ED,中性洗涤纤维降解特征参数c,酸性洗涤纤维降解特征参数a和a+b,有机物降解特征参数b。DMD最优降解模型为Logistic模型,NDFD最优降解模型为Logistic模型,ADFD最优降解模型为Logistic模型,OMD最优降解模型为Allometric模型。结论:综合价值评价结果,发酵第60 d各处理按价值优劣排序为:T>YX>TY>TX>CK>Y>TYX,因此复合发酵情况下,纤维素分解菌与异质型LAB复合发酵效果较好,其可明显提高青贮玉米的品质和饲用价值。此结果为解决我国饲料紧缺问题提供了有利的基础,并为我国新型生物青贮添加剂的开发提供了理论依据。