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将禽流感H5N2灭活抗原分别与CpG和重组IL-2配合鼻腔免疫SPF鸡,研究对鸡呼吸道局部和全身免疫水平的影响。试验分为4组,第一组为CpG佐剂组,禽流感H5N2灭活抗原与cpG配合鼻腔免疫动物;第二组为IL佐剂组,禽流感H5N2灭活抗原与重组IL-2配合鼻腔免疫动物;第三组为H5免疫纽,单独应用禽流感H5N2灭活抗原鼻腔免疫动物;第四组为对照组,鼻腔免疫生理盐水;免疫期为56天。首先,通过检测呼吸道中上皮内淋巴细胞(IEL)数量、肥大细胞数量和CD3~+T细胞数量来探讨禽流感H5N2灭活抗原鼻腔免疫对鸡呼吸道局部细胞免疫的影响;通过检测呼吸道各段IgA和IgG分泌细胞数量来探讨禽流感H5N2灭活抗原鼻腔免疫对呼吸道局部体液免疫的影响;然后,通过检测血清中特异性IgG和IgA抗体水平来探讨禽流感H5N2灭活抗原鼻腔免疫对全身免疫水平的影响;最后,通过攻毒试验来验证禽流感H5N2灭活抗原鼻腔免疫后,鸡群对H5N1强毒株攻击的抵抗力。 1.禽流感H5N2灭活抗原鼻腔免疫对鸡呼吸道局部细胞免疫水平的影响 应用HE染色法显示呼吸道各段上皮内淋巴细胞,结果发现:CpG佐剂组和IL佐剂组气管和气管叉IEL数量比对照组显著或极显著增多(P<0.05或P<0.01);而单独使用禽流感灭活抗原气管和气管叉IEL数量则无显著变化。提示禽流感H5N2灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫对鸡气管和气管叉IEL数量有明显的促进作用。 应用ABC染色法显示呼吸道各段CD3~+T细胞,结果发现:在气管、气管叉和肺CpG佐剂组和IL佐剂组CD3~+T细胞比对照组显著或极显著增多(P<0.05或P<0.01);单独使用禽流感灭活抗原对CD3~+T细胞数量影响不显著。提示禽流感H5N2灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫动物亦能明显提高鸡气管、气管叉及肺的CD3~+T细胞数量。 应用甲苯胺蓝染色法显示呼吸道各段肥大细胞,结果发现:在喉部、气管、气管叉和肺CpG佐剂组和IL佐剂组肥大细胞比对照组显著或极显著增多(P<0.05或P<0.01);单独使用禽流感灭活抗原呼吸道各段肥大细胞数量无明显变化。提示禽流感H5N2灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫对喉部、气管、气管叉及肺的肥大细胞数量有显著