凡纳滨对虾水孔蛋白-4基因克隆、表达及其对盐度胁迫的反应研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:douliangster
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei),俗称南美白对虾,是我国最主要的养殖对虾。凡纳滨对虾是一种广盐性的对虾,对盐度耐受范围广,可以在海水、咸淡水甚至在淡水中成活。凡纳滨对虾能够在不同的盐度中成活,这与其强大的渗透压调节能力有着密切的关系,因此深入研究渗透压调节基因,对阐明渗透压调节分子机制和选育耐低盐品种具有重要作用。水孔蛋白(aquaporin,AQP)是渗透压调节过程中的一种关键蛋白,本文围绕凡纳滨对虾水孔蛋白-4基因(LvAQP4)进行了以下研究:  1.通过RACE方法,首次从凡纳滨对虾中克隆到LvAQP4的全长cDNA序列。获得的LvAQP4 cDNA序列全长为1048bp,其中包括75bp的5UTR,187bp的3 UTR和786bp的ORF。根据ORF序列推导出LvAQP4编码261个氨基酸,预测其分子量为27.85kDa,等电点为8.11。推导的氨基酸序列与其它甲壳动物的AQP相似度为48.8%到97.3%。进化分析显示LvAQP4属于AQP1-like亚族、AQP4类。  2.阐述了LvAQP4在组织和细胞中的分布情况。实时荧光定量PCR结果表明,LvAQP4在不同组织中均有表达,其中鳃的表达量最高,其次为肌肉、脑、眼柄和肝胰腺,而血淋巴、肠、胃和胸神经节中表达量则较低。原位杂交结果显示,LvAQP4在鳃上皮细胞中广泛表达。亚细胞定位结果显示,LvAQP4在胞内广泛表达。  3.在活体内研究了凡纳滨对虾鳃和肝胰腺LvA QP4 mRNA在高盐(40‰)和低盐(4‰)刺激下的表达模式。在高盐条件下,凡纳滨对虾鳃LvAQP4表达量先降低后升高,而肝胰腺LvAQP4表达量则先升高后降低,并恢复到刺激前水平。在低盐条件下,凡纳滨对虾鳃LvAQP4表达量先降低后升高最后又恢复刺激前水平,而肝胰腺LvAQP4表达量无显著变化。结果表明:LvAQP4与凡纳滨对虾渗透压调节相关,但在鳃和肝胰腺中表达模式有差异。  4.在体外高渗条件下,研究了凡纳滨对虾鳃孵育碎片和肝胰腺原代细胞LvAQP4的表达模式。结果发现,NaCl和蔗糖高渗条件都能增加LvAQP4表达量,但NaCl较蔗糖更为明显。结果表明:体外高渗条件能增加LvAQP4表达量。
其他文献
作为一种广盐性的甲壳动物,凡纳滨对虾可以适应0.5~40‰的盐度范围,在盐度15~20‰条件下生长较快。研究显示低盐水平下对虾类的生长、蜕皮、氧消耗、血蓝蛋白含量、酶活力、物质
环境胁迫可能引起广盐性对虾的应激反应,我们首先评估了凡纳滨对虾在逐渐降低pH(6.65-8.20)和逐渐升高pH(8.20-9.81)对比正常pH(8.14-8.31)条件下饲养28天的死亡率、生长性能
该文主要从渔场与捕捞技术两方面,试对西北太平洋(145°E以东)的柔鱼渔业的发展做出分析.
郑州市管城区回民第一小学是一所起点高、环境美、设施新、功能全、充满现代化气息的花园式新学校,占地8.8亩,建筑面积有7036平方米,绿化面积达标,教育教学环境、设施先进.
日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)系甲壳动物,是我国东南沿海重要的经济养殖种类。近年来,随着对虾养殖业以及分子生物学技术的快速发展,与对虾性腺发育相关基因克隆与表达逐渐
2005年9月24日,来自北京奥组委、环保NGO、北京30所学校的“根与芽”小组、赞助商雪佛龙德士古中国能源公司及相关中外媒体的代表举座言欢,在大山子798工厂的时态空间艺术中
用面包酵母培养的轮虫(Rotifer)缺少海水鱼苗所需的高不饱和脂肪酸,同时卤虫(Artemia franciscana)无节幼体也缺少高度不饱和脂肪酸,容易导致海水鱼苗存活率低。本文研究浓缩小球
电脑对人体生理和心理方面的负面影响已日益受到人们的重视.怎样才能减少危害呢?
学位