盐角草胆碱单加氧酶(CMO)基因在烟草中的表达及耐盐性的研究

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在干旱、盐碱等逆境条件下植物体内可积累大量的甜菜碱,甜菜碱的积累对改善渗透调节、保护细胞膜具有重要作用,因此甜菜碱被认为是很有效的渗调剂之一。胆碱单加氧酶(CMO)是甜菜碱合成途径中的限速酶,它被认为是最有希望的抗逆基因之一。本研究利用根癌农杆菌(Agribecterium tumefaciens)GV3101介导的叶盘转化法,进行了胆碱单加氧酶基因的遗传转化,将从盐角草(Salicornia europaea)中克隆到CMO基因导入到烟草(Nictiana tabacum L.cv.89),获得卡那霉素抗性植株。对卡那抗性株的PCR、Southernblot、RT-PCR等分子检测结果表明CMO基因已整合到烟草基因组中并在转录水平上得到了表达。选择部分PCR阳性植株进行耐盐性筛选。在相同盐胁迫条件下,转基因植株所受到的盐伤害明显地较对照植株轻。对300mmol/LNaCl胁迫下转CMO基因烟草的相对电导率、叶绿素含量、甜菜碱含量、SOD酶和POD酶活性以及失水速率的分析结果表明,转基因烟草的叶绿素含量、甜菜碱含量、SOD酶和POD酶活性这几项生理指标均高于对照,而相对电导率、失水速率则低于对照,这说明转入的CMO基因可以显著地提高烟草的耐盐能力。
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