【摘 要】
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目的:分离纯化大鼠胰岛,探索胰岛体外长期培养的新方法,为胰岛移植治疗糖尿病提供数量多、质量好的胰岛.方法：1.取16~22天龄雄性Wistar大鼠睾丸Sertoli细胞.2.采用改良的胰管
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目的:分离纯化大鼠胰岛,探索胰岛体外长期培养的新方法,为胰岛移植治疗糖尿病提供数量多、质量好的胰岛.方法：1.取16~22天龄雄性Wistar大鼠睾丸Sertoli细胞.2.采用改良的胰管内顺行灌注胶原酶消化Wistar大鼠胰腺,Ficoll不连续浓度梯度纯化,手挑法检出全部胰岛,用DTZ鉴定胰岛.3.分为胰岛单独培养组和胰岛与Sertoli细胞联合培养组,应用倒置显微镜和荧光显微镜观察单独培养组和联合培养组的胰岛形态和存活率,在培养的第3d、7d、14d、28d用放射免疫法测定胰岛素分泌量,并进行胰岛素刺激实验.结果：收获(510±52)个胰岛/胰腺,回收率平均53.6﹪,活率为95﹪,纯度为100﹪.单独培养7d,胰岛存活率显著下降,胰岛素24h累积分泌量和对葡萄糖的刺激反应显著下降.与Sertoli细胞联合培养的胰岛,存活时间明显延长,存活率比单独培养组显著增加,胰岛素分泌量始终处于高水平状态,并对葡萄糖刺激反应敏感.结论：该法胰岛分离纯化率高,胰岛与睾丸Sertoli细胞联合培养可以促进胰岛生长,显著延长存活时间,是一种较好的体外长期培养胰岛的方法.
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