云南杨树桑黄化学成分及抑制H22肝癌细胞作用的研究

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桑黄 Phellinus Linteus为担子菌亚门层菌纲多孔菌目锈革孔菌科针层孔菌属类的真菌,使用历史悠久,极具开发价值。  肿瘤是危害人类生命的疾病,死亡率仅次于心脑血管系统疾病,居各类疾病死亡率的第二位。长期以来,寻找抗癌生物资源与天然药物成为各国学者的一个共同愿望。近年来,从天然药物中提取抗肿瘤有效成分日益得到人们的重视。桑黄是一种药食同源的真菌。现代研究证实桑黄能够提高人体的免疫力,减轻抗癌剂的副作用,可用来辅助肿瘤病人的放疗和化疗。  本课题以采自云南杨树桑黄、黑龙江桦树桑黄、内蒙古杨树桑黄为研究对象,对其化学成分及肝癌细胞H22肝癌细胞增殖的作用进行了系统研究。  经查阅文献得知,桑黄水提物显示出较好的抗肿瘤活性。水提物的主要成分为多糖,寄生于不同树上的桑黄的多糖含量不同,我们对不同产地的桑黄多糖含量进行了比较研究。对黑龙江桦树桑黄、内蒙古杨树桑黄、云南杨树桑黄的多糖提取后进行了含量测定,通过多糖含量测定实验得到:黑龙江桦树桑黄纯多糖含量为74.13%;内蒙古杨树桑黄纯多糖含量为60.54%;云南杨树桑黄纯多糖含量为50.83%。  对云南杨树桑黄的乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等不同溶剂进行萃取,通过MTT实验方法,评价了它们的对H22肝癌细胞的抑制作用。结果表明:桑黄乙醇提取物的石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物具有较强的抑制H22肝癌细胞作用。  将石油醚萃取物利用气相色谱-质谱联用仪对提得物质进行分离和鉴定,采用色谱峰面积归一化法确定脂溶性各组成成分的相对含量。结果共分离出25个峰,鉴定了其中24个成分,占脂溶性总成分的95.37%。  采用反复硅胶柱层析、大孔吸附树脂及Sephadex LH-20从桑黄中分离得到8个单体化合物,并运用1H-NMR、13C-NMR等进行了结构鉴定,分别为:癸醇(1)、四己基苯甲醇(2)、二十五烷(3)、麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(4)、胆甾烯醇(5)、7-羟基香豆素(6)、柚皮素(7)、山奈素(8),其中胆甾烯醇和山奈素是首次从桑黄中分离得到。化合物4、5、7通过MTT实验方法评价了抑制H22肝癌细胞增殖的作用。  结果显示:化合物4、5、7也均有一定的抗H22肝癌细胞增殖作用,化合物4的效果显著。
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