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目的:
一、评估腹侧撞击器脊髓分级挫伤动物模型的稳定性。二、探讨振荡电场对大鼠完全性脊髓损伤运动功能恢复的作用。
方法
本实验分为二部分
一、将38只成年SD雌性大鼠随机分为23伏组(A组)、25伏组(B组)和对照组(C组),实验组每组14只,对照组10只。A组实施23伏撞击,B组实施25伏撞击,C组为假手术组,实施0伏的撞击,实验后1d、7d、2w、4w通过BBB评分观察双侧后肢运动功能,并于实验后4w取材行H-E染色,用Photoshop CS软件直方图命令处理连续切片中脊髓最大受损面积的图像,计算大鼠脊髓最大受损面积比,对BBB评分与大鼠脊髓最大受损面积比进行相关性分析。
二、将30只成年SD雌性大鼠用腹侧撞击法制备完全性脊髓损伤模型后随机分为两组。两组均在损伤节段的上下各一个节段椎板间隙,放置振荡电场刺激器,实验组实验后即刻给予振荡电场环境干预至实验后2w,而对照组不予振荡电场的条件。在实验后第1d,3d,7d,2w通过BBB评分观察双侧后肢运动功能的变化,并于实验后2w通过1.形态学:H-E染色,免疫组织化学染色(神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白)观察局部脊髓的变化。2.神经电生理:运动诱发电位观察脊髓运动传导的变化。
结果
一、B组大鼠脊髓周边有少量的脊髓组织残留,4w的神经功能恢复较少,A组大鼠脊髓有较多的脊髓组织残留,脊髓损伤集中在腹侧及附近,4w时的神经功能恢复较大,两组的BBB评分在各个时间点具有统计学意义(P<0.001),较术前有明显的统计学意义(P<0.001),且BBB评分与脊髓残留组织呈直线性相关(P<0.001)。C组大鼠实验后也有轻度神经功能障碍,但是这种情况只出现在实验初期,表明熟练的操作可避免撞击钩腹侧勾绕过程中造成的脊髓损伤。
二、实验组和对照组实验后2w行为学评价.BBB评分,电生理学评价-运动诱发电位(MEP-motor evoked potential),右后肢潜伏期差具有统计学意义(P<0.05),即脊髓运动传导有所改善。
结论
一、腹侧撞击器可稳定提供两种损伤程度的急性脊髓损伤模型,23伏电压撞击可提供不完全性脊髓损伤模型,25伏电压撞击可提供完全性脊髓损伤模型。
二、伤后2w,振荡电场能改善急性脊髓损伤大鼠的脊髓运动传导功能,但大鼠的运动功能恢复无统计学差异,组织学观察也未见统计学差异。振荡电场对大鼠脊髓损伤的长期作用需进一步研究。