大鼠DRG加压培养细胞模型建立和持续压迫对DRG上TRPV4表达的影响

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhenghaiwei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:建立大鼠背根神经节(Dorsal root ganglion,DRG)细胞加压培养模型,观察在恒定压力下培养24h和48h的神经元形态和活性的变化,评价这种神经元加压培养模型的优缺点。方法:取新生Wistar大鼠腰背段全部DRG,将处理好的DRG神经元进行培养,根据受压时间,将神经元随机分为正常对照组、受压24h组、受压48h组,在80mmHg压力的密闭环境中培养相应时间后观察各组神经元在荧光显微镜和电镜下的形态学特点,并用MTT法分析各组神经元细胞生长活性的改变。结果:①荧光显微镜下观察加压培养组DRG神经元形态较正常未受压组五无明显差异。②超微结构示加压48h组和24h组神经元较正常组线粒体肿胀明显,粗面内质网缩短,变少,游离核糖体增多,部分核固缩,神经元代谢水平下降。③MTT法比较加压前、后各组神经元活性的差异无统计学意义。结论:加压培养未对DRG神经元活性产生显著影响,此模型可观察机械压力单一因素对神经元的影响,有望成为一种在亚细胞和分子水平研究机械压力对DRG神经元的影响的有效细胞模型。目的:建立大鼠背根神经节持续压迫模型,测定术后大鼠运动功能和机械痛阈的变化,观察背根神经节受压后组织形态学改变,测定受压不同时间后大鼠背根节上TRPV4通道蛋白的表达变化,探讨TRPV4离子通道在背根神经节受到持续压迫后产生疼痛的机制中所发挥的作用。方法:健康雄性Wistar大鼠63只,随机分为空白对照组(n=9)、假手术7天组(n=9)、假手术14天组(n=9)、假手术28天组(n=9)、手术7天组(n=9)、手术14天组(n=9)、手术28天组(n=9)。建立大鼠背根神经节持续压迫模型。测定手术后不同时期(1天、3天、5天、7天、9天、11天、13天、15天、17天、19天、21天、23天、25天及27天)动物运动功能和机械刺激痛阈阈值等神经行为学指标的变化情况。造模后7天、14天、28天取材,HE染色,光镜下观察背根神经节的组织形态学改变:采用Western-Blotting技术结合凝胶分析系统,分析压迫不同时间后,背根神经节上TRPV4通道蛋白表达的变化。结果:①手术组各时间段大鼠右后肢机械痛阈值的改变具有显著性差异,出现明显的痛觉过敏现象,空白对照组及各假手术组各时间段的机械痛阈值均无明显改变。②术后7天组的病理切片显示持续受压的背根神经节出现组织水肿,神经元空泡样变性,间质血管充血;术后14天时神经外膜和神经纤维水肿明显,神经元空泡样变性,核固缩,间质充血,局部少量炎细胞浸润;术后28天时神经元水肿明显减轻,局部纤维母细胞增生,神经内膜增厚。而空白对照组及各假手术组背根神经节病理改变不明显。③和相应假手术对照组相比,手术后7天、14天及28天的背根节上TRPV4通道蛋白的表达均明显高于其同时期假手术组。结论:建立大鼠背根神经节持续压迫模型,手术组损伤侧后肢出现机械痛觉过敏,受压背根节在急性期主要表现为炎症反应,慢性期表现为以纤维组织增生为主,在此模型基础上测定手术组背根节上TRPV4通道蛋白的表达水平随时间延长有增多的趋势,说明TRPV4通道可能与大鼠背根节受到持续压迫后异常痛觉的产生有关。
其他文献
摘 要:教育的城乡差异主要表现在城市学生和乡镇学生所处的学校环境不同,传授知识的教师水平不同,父母的培养和期望不同等方面。就英语学科而言,由于教育的城乡差异造成城市学生和乡镇学生在英语听说能力上存在较大差距。因此,乡镇教师在教学过程中应尽量减少城乡差异带来的限制,注意学生英语听说能力的培养。  关键词:教育城乡差异的表现;听力教学;口语教学  随着科学技术的高速发展,我国在国际舞台上扮演着越来越重
摘 要:随着教育体制不断改革与发展,初中数学的教材内容逐渐呈现出分布较广的特点,学生要面对较多题型,这就对其解题能力有了一定要求。为了实现新时代的课程目标,教师教学的工作重点应当放在培养学生的数学分析能力和解题能力上,这是提高学生应用数学和解决实际问题的根本途径。本文结合当前数学教学现状,就初中教师在教学过程中如何提高学生的解题能力做简要分析并提出相关教学策略。  关键词:初中数学;解题能力;教学
摘 要:由于小学生现在的知识水平还比较低,因此只能通过将思维外显帮助其具象性思维成型,通过思维导图来培养小学生的数学思维外显能力,可以为他们以后的数学学习奠定基础。本文通过研究思维导图在小学数学中的作用,对如何提升小学生数学思维外显能力给出了几点建议。  关键词:思维导图;小学生;数学;思维外显能力  一、 小学数学教学中思维导图的作用  (一) 有利于加强对数学知识的理解  在数学知识的学习与理
目的:了解急性心肌梗死(AMI)患者静滴1,6-二磷酸果糖(FDP)的局部疼痛状况。评价采用5种不同的护理干预方法减轻患者静滴FDP时局部疼痛的效果。观察5种不同的护理干预对AMI患
摘 要:小学英语教师课堂教学活动设计与实施能力是影响课堂教学质量的重要因素,为了不断提高课堂教学的有效性,就要不断提高教师的课堂教学活动设计与实施能力。在课堂教学中,要结合学生的学习特性,设计出有效的教学活动,才能立足于实践,促使学生全面发展。本文针对小学英语课堂教学活动设计的有效性进行分析。  关键词:小学英语;课堂教学活动设计;有效性  一、 引言  小学阶段的英语教育是启蒙教育、起点教育,也
摘 要:当前部分农村地区学生的英语水平不高,他们对英语几乎没有长久的兴趣,很难继续坚持学习。导致这一情况存在的原因有很多,比如环境影响、教师影响、家庭的影响等。以此为背景,本文将对当前农村学生英语成绩差的原因展开分析,并针对农村学生的特殊情况,提出激发其英语学习兴趣、提升英语成绩的对策。  关键词:农村学生;英语成绩;成绩差  一、 部分农村学生英语水平不高的原因  (一) 部分农村学生对英语学习
摘 要:加强互动是课改下英语教学的基本理念,也是打破“师道尊严”的一种有效方式。也就是说,一线教师要从多角度入手,通过多种活动的开展来加强互动,以此来逐步提升学生的英语基本素养。所以,本文笔者结合自身的教学经验,从“游戏”“情境”“对话”三个活动的开展为例,对如何开展互动式英语课堂,如何加强师生互动进行论述,以确保学生在轻松、自主、交流的英语课堂中提高效率,锻炼能力。  关键词:互动式;初中英语;
摘 要:在小学英语教学的过程中教育者越来越趋向于将自己教学模式尽可能地与社会的发展相适应。在小学英语教学过程中,教育者对学生的应用情景教学模式在一定程度上能够帮助学生的英语知识得到进一步的提高,让学生的语言实践得到启发也能够让更多的学生参与到课堂的教学当中来提升自己的英语能力。英语本身就是一门需要不断积累的学科,如何在小学英语教学的过程当中为学生开设有效的情景模式来提升学生的英语课堂教学质量是非常