早花籽金桂离体胚的组培快繁技术研究

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本研究以生长健壮、树型优美的早花籽金桂(Osmanthus fragrans‘Zaohuazijingui’)的胚作为外植体材料进行组织培养快繁技术研究,选择基本培养基、激素配比等技术参数为指标,通过双因素随机试验设计、正交试验设计及统计分析方法,确定影响早花籽金桂离体培养的关键因素,探讨植株再生的可能途径及适宜的培养条件,研究结果如下:1.早花籽金桂胚的最佳取材季节为3月中旬,启动率高达到88.90%。2.初代培养:最适培养基配方为MS+1.50mg/L6-BA,启动率可达90%,平均苗高为2.10cm。3.幼胚苗伸长增殖培养:最适培养基为MS+2.0mg/LGA,新增叶片数5.00片,新增节数2.67节,平均生长量1.58cm。4.胚苗生根培养:最适培养基为1/2MS+2.00mg/LNAA,生根率达80%,平均生根数4.00条,平均根长0.70cm。5.愈伤组织的诱导:以无菌苗的幼叶为外植体,愈伤组织诱导的最适培养基配方为MS+2.0mg/L6-BA+0.3mg/L2,4-D,诱导启动率达66.10%;形成的愈伤组织黄绿色,质地致密。暗培养比光培养更有利于愈伤的产生,且暗培养时间以2周为宜。6.愈伤组织的增殖:最适培养基为MS+2.0mg/LBA+0.1mg/L2,4-D+0.05mg/LNAA,增殖率为72.41%。愈伤组织在增殖过程中,一开始时生长良好,但是两周后出现较严重的褐变死亡现象,尚未实现愈伤组织分化。7.幼胚苗茎段初代培养:最适培养基配方为MS+2.00mg/L6-BA+0.10mg/LNAA,启动率达55.77%;幼嫩茎段萌发诱导出的新芽生长速度缓慢,尚未实现带芽茎段增殖培养。
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