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目的本研究通过响应面法优化液体发酵及发酵罐发酵获得黑木耳胞外多糖,并通过乙醇沉淀法分离胞外多糖,以黑木耳多糖为原料对其进行纳米硒化,并进一步考察纳米硒化黑木耳多糖的抗菌活性和抗肿瘤活性,旨在为进一步对纳米硒化黑木耳多糖研究奠定基础,为更合理开发和利用黑木耳这一药用资源提供依据。方法以黑木耳菌原菌作为材料,在无菌条件下对黑木耳菌进行PDA培养。对培养成功后的黑木耳菌转移至液体培养基中,并通过响应面法优化液体发酵的培养条件。单因素法优化发酵罐发酵条件。培养液体所得的黑木耳多糖通过苯酚硫酸法来进行检测。对黑木耳多糖进行纳米硒化,并将纳米硒化后的黑木耳多糖通过TEM进行表征,观察并测量其粒径大小。考察所得纳米硒化黑木耳多糖的抗菌和抗肿瘤活性,通过MTT法进行纳米硒化黑木耳多糖的抗肿瘤活性实验。结果白色丝状体黑木耳菌在扩大培养的PDA培养基上长势良好。响应面法优化的液体培养基适合黑木耳菌生长。黑木耳菌液体发酵胞外多糖的最优条件为碳源可溶性淀粉3%、氮源胰蛋白胨0.15%、水果皮莎白瓜皮4%、中药材红景天10%,在此条件下的黑木耳菌液体发酵胞外多糖含量为0.02451 g/ml。发酵罐培养单因素试验中,最佳温度为26℃,在此条件下胞外多糖含量最高。最佳转速为120r/min,在此条件下胞外多糖含量最高。利用实验获得的纳米硒化黑木耳多糖溶液进行抑菌试验,其中对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为50mg/mL,抑菌圈直径为7.34mm;对枯草杆菌的最小抑菌浓度为25mg/mL,抑菌圈直径为6.58mm;对大肠杆菌的最小抑菌浓度为12.5mg/mL,抑菌圈直径为7.95mm;对绿脓杆菌的最小抑菌浓度为50mg/mL,抑菌圈直径为6.97mm。通过纳米硒化黑木耳多糖进行抗肿瘤实验,1.5mg/ml的抑制率为61.27%,1mg/ml的抑制率为44.22%,0.5mg/ml的抑制率为41.36%,0.25mg/ml的抑制率为36.75%,0.125mg/ml的抑制率为28.96%。结论以黑木耳菌液体发酵胞外多糖为考察目标,通过实验获得了黑木耳菌液体发酵胞外多糖的最优条件,在此优化条件下的黑木耳菌液体发酵胞外多糖含量最高。同时在发酵罐培养优化实验获得的培养最优条件下,也可以获得较高含量的黑木耳多糖。通过实验获得纳米硒化黑木耳多糖溶液,并且采用TEM进行了表征,符合纳米的粒径要求。在抑菌实验中,我们可以观察到纳米硒化黑木耳多糖溶液对大肠杆菌抑菌效果最佳。通过纳米硒化黑木耳多糖抗肿瘤实验,浓度越高抑制效果越好,最佳浓度为1.5mg/ml,其抑制率为61.28%,表明纳米硒化黑木耳多糖溶液对肿瘤的生长抑制效果明显。