【摘 要】
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红螯螯虾是我国重要的经济虾类之一,近年来,随着螯虾养殖业的发展,种质退化和病害问题日益严重,尤其是红螯螯虾的肠道健康问题引起普遍关注。大量研究表明,乳酸菌能够调节动物肠道微生态平衡,促进动物健康生长,提高其免疫性能,但其在红螯螯虾方面较少进行研究和应用。本研究通过对比试验,探究饲料添加乳酸乳球菌对红螯螯虾生长和免疫性能及其肠道菌群的影响,为微生态制剂在虾蟹类养殖中的合理应用提供科学依据和试验数据。
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红螯螯虾是我国重要的经济虾类之一,近年来,随着螯虾养殖业的发展,种质退化和病害问题日益严重,尤其是红螯螯虾的肠道健康问题引起普遍关注。大量研究表明,乳酸菌能够调节动物肠道微生态平衡,促进动物健康生长,提高其免疫性能,但其在红螯螯虾方面较少进行研究和应用。本研究通过对比试验,探究饲料添加乳酸乳球菌对红螯螯虾生长和免疫性能及其肠道菌群的影响,为微生态制剂在虾蟹类养殖中的合理应用提供科学依据和试验数据。本研究将红螯螯虾饲养在相同的水体环境中,随机分为A、B、C、D四个组,每组设3个重复。以基础饲料中分别添加A:1.5×10~6 CFU/g、B:1.5×10~7 CFU/g和D:1.5×10~8CFU/g浓度的乳酸乳球菌为试验组,对照C组基础饲料加PBS,投喂颗粒饲料的方式养殖红螯螯虾60d。养殖结束后,进行维氏气单胞菌攻毒试验。主要研究结果如下:（1）养殖结束后,试验A和B组红螯螯虾的体重和特定生长率均显著高于对照组（P<0.05）;试验D组螯虾的体重和特定生长率与对照组相比,差异不显著（P>0.05）;B组螯虾体重指标显著高于A组（P<0.05）;添加乳酸乳球菌浓度为1.5×10~7 CFU/g的B组的促生长效果最佳。（2）与对照组相比,试验B组的淀粉酶和超氧化物歧化酶（SOD）活性均显著高于其他各组（P<0.05）;A和B组的胰蛋白酶活性均显著高于对照组（P<0.05）;谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）和多酚氧化酶（PPO）活性各组差异均不显著（P>0.05）。（3）养殖周期内,与对照组相比,B组和D组SOD1和SPI基因相对表达量均显著高于对照组（P<0.05）;各试验组的ALF基因的相对表达量均显著高于对照组（P<0.05）。B组CHH基因相对表达量显著高于对照组（P<0.05）。（4）微生物组测序发现,各试验组螯虾的肠道菌群结构与对照组相比均发生了显著变化,以添加量为1.5×10~7 CFU/g的B组变化最大。变形菌门（Proteobacteria）和厚壁菌门（Firmicutes）为螯虾肠道优势菌门。γ-变形杆菌纲（Gammaproteobacteria）、芽孢杆菌纲（Bacilli）、α-变形菌纲（Alphaproteobacteria）是三个优势菌纲。微生物群落多样性指数、组成和功能预测结果表明,添加量为1.5×10~7 CFU/g的B组螯虾有较好的肠道微生态环境,微生物菌群最丰富,有益菌数量和种类均最多。（5）通过基因功能预测发现,红螯螯虾肠道菌群中有45%以上的基因与新陈代谢类功能有关,这说明肠道菌群参与了红螯螯虾的生理代谢过程。（6）攻毒后24h酶活性和定量检测结果显示,A组和D组虾个体肝胰腺组织中的SOD和碱性磷酸酶（AKP/ALP）活性均显著高于对照组（P<0.05）;A、B、D组的酸性磷酸酶（ACP）活性、PPO活性均显著高于对照组（P<0.05）。D组的SOD1、ALF、SPI和CHH基因相对表达量显著高于对照组（P<0.05）;A组和B组的SOD1和SPI基因相对表达量显著高于对照组（P<0.05）。综上所述,饲料添加乳酸乳球菌,显著提高了红螯螯虾的生长性能;提高了螯虾肝胰腺组织消化酶的活性;提高了螯虾的免疫性能;改善了螯虾肠道微生物群落的组成和丰度。添加量为1.5×10~7 CFU/g浓度乳酸乳球菌对红螯螯虾促生长效果最佳;而添加量为1.5×10~8 CFU/g乳酸乳球菌对促进螯虾免疫性能提高的效果最佳。
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