血管钠肽（VNP）是钠尿肽家族的新成员，它有扩张血管、抑制平滑肌细胞增殖的作用，而低氧环境是造成心成纤维细胞（CFs）增殖的原因之一，VNP对低氧促CFs生长的抑制作用及其机制还不清楚，因此，作者研究VNP对低氧促CFs生长的影响，并探讨其机制。 以新生SD大鼠CFs为研究对象，采用四唑盐比色实验（MTT）法、细胞周期测定法和³H-TdR掺入量测定，观察了VNP对低氧促CFs生长的影响。通过细胞内Ca²⁺水平测定和Fos蛋白免疫组化实验对其机制进行了初步探讨，得到了以下结果：一．VNP对低氧促CFs生长的作用 低氧可以促进CFs生长。20 ml/L～30 ml/L低氧组MTT OD值显著高于对照组（P＜0.05）。VNP(10^-6～10^-8mol/L)对低氧促CFs生长有抑制效应，也有剂量依赖性。VNP+低氧组MTT OD值显著低于低氧组（P＜0.05）。二．VNP和低氧对CFs细胞周期的影响 流式细胞分析表明，与常氧对照组相比，CFs缺氧培养24h 第四军医大掌硕士学位论文后，显著增加进入 GZ川期的细胞比例（KO．05），而显著减少进入GO／GI期的细胞比例（RO．01）。VNP(10－’mol／U能减少缺氧CFs进入 GZ／M期的细胞比例（HO．05），增加进入 GO／GI期的细胞比例（RO．05）；使更多的CFS处于相对静止期。5．VNP对低 氧时队S内‘H－TdR掺入水平的影响 低氧使CFS’H－TdR掺入水平显著增高，VNP可显著降低低氧时’H－TdR的掺入水平，而且有剂量依赖性。对照组为（100士7）％cpm，低氧时为（129土14）％cpm，当加入 10－‘、10－’mol／乙和 10－”mol／L VNP后，分别降为（105士8）％cpm、（95土14）％cpm(81土刀％Cpm，较低氧组分别降低18．6％、26．3％及37．2％（HO．05）。当加入 2．5x10－‘mol／L维拉帕米后，低氧及常氧组的值均降低，而且与对照组相比有显著性差异（KO．of）。四．VNP和呵 氧对CFs内Ca‘“水平的影晌 低氧使CFs内Ca‘”水平显著升高，VNP（10－‘mol／L）可以降低低氧时CFs内Ca‘”水平。五．VNP对低 氧刺激CFS白C－fos原癌基因表达的影回 对照组（常氧、不加 VNP）有少量细胞呈弱阳性表达，20ml／L～30 ml／卜低氧组的 Fos样免疫反应阳性 CFs占（84．6t7．8）％，染色强度为Q．6从U(HO．05，VS对照组入 阳性产物主要存在于细胞核中，呈椭圆形或圆形，紫黑色，可见不着色的核仁区，偶见小核。单独用VNP （ 0‘mol／L）处理，对心肌细胞Fos蛋白表达无显著影响。以 VNP（10－‘mol／L）预处理 30 min，可减弱低氧增强FOS 蛋白表达的作用，F。S样兔疫反应阳性吓S 占 －2－ 第四卑医大学硕士学位论文n．10．1W染色强度为（侣4．6土10．针从以0．05，化 低氧组），但F。S蛋白的表达仍高于对照组的基础水平。 结果表明VNP可以减弱低氧的促CFS生长作用，其机制可能与降低细胞内Ca‘“水平以及原癌基因cdes的表达有关。