【摘 要】
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破解神经环路的工作机制是神经科学领域的重要任务,而获得环路中神经元的结构联结则是达到这一目标的必要途径。近年来出现了许多基于连续电镜的图像采集方法,可以快速获得高分
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破解神经环路的工作机制是神经科学领域的重要任务,而获得环路中神经元的结构联结则是达到这一目标的必要途径。近年来出现了许多基于连续电镜的图像采集方法,可以快速获得高分辨率的结构图像,但由于数据量巨大,重构神经元并识别其类型则耗时费力。另一方面,黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)成虫脑中的蘑菇体(mushroom body)这一神经环路参与了学习记忆、嗅觉信息稀疏编码和两难抉择等认知功能,环路中一对以GABA(gam ma-Aminobutyric acid)作为神经递质的抑制性神经元APL(anterior paired lateral)则起了关键作用。APL的分支细小而密集,已有的光学水平的结构研究无法有效分辨其分支结构。APL的突触联结更是超出了光学分辨率的极限。在本研究中,使用了离子束扫描电镜方法(focused ion beam scanning electron microscopy,FIB-SEM)获得了蘑菇体竖直叶上的连续电镜数据;同时在APL中表达膜定位的辣根过氧化物酶(horse-radishperoxidase)作为标记,解决了在电镜数据中识别APL的难题。我们详细描述了APL在蘑菇体竖直叶中的形态,发现其神经突(neurite)在α叶中的分支相对独立,在α叶中的分支相互联系程度较高,而在α与α叶之间仅有一处相连;神经突的单个分支有交替分布的膨大区和细小区;并且输入突触与输出突触呈混合排列状态。这提示APL并不像先前光学水平的研究中所认为的整体呈网状,而可能存在局部信息流动,有多个信息处理的亚单元。在环路联结方面,α叶中的APL与其输入和输出神经元有大于60%的比例仅形成一个突触联系,提示环路中存在侧向抑制结构。综上,发展了在连续电镜中标记特定神经元的方法,大大提高了神经元识别的速度和准确率,为脑联结图谱的研究提供了方法学的参考;详细描述了APL的结构并首次揭示了这一单一神经元作为多个信息处理器的可能性。
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