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目的:研究丹参多糖(Salvia miltiorrhiza polysaccharide,SMP)和丹参素钠(sodium Danshensu,SDSS)对人外周血T淋巴细胞增殖和杀伤活性的影响及其作用机制。方法:采用水提醇沉法提取SMP并纯度鉴定;Ficoll密度梯度离心法分离人外周血淋巴细胞,细胞分为两部分,一部分淋巴细胞加药处理,流式细胞仪检测不同浓度SMP和SDSS对淋巴细胞表型(CD3+、CD14+、CD19+、CD56+)的影响;倒置荧光显微镜、细胞计数仪和CFSE染色考察不同浓度SMP和SDSS对淋巴细胞增殖的影响;钙黄绿素法检测其对淋巴细胞杀伤能力的影响;一部分细胞按照CIK培养,加入细胞因子刺激活化,按照上述步骤检测两种药物对CIK细胞增殖的影响。提取细胞样品总RNA和蛋白,用RT-PCR检测细胞增殖相关基因IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TLR家族mRNA基因表达变化。用Western Blotting检测MAPK信号通路和NF-κB信号通路相关蛋白ERK、JNK、IκBα、p-p65等蛋白的变化。为验证SMP和SDSS刺激T淋巴细胞增殖活化是否是通过MAPK信号通路和NF-κB信号通路发挥作用,分别用ERK抑制剂(U0126)、JNK抑制剂(SP600125)和IκBα抑制剂(BAY11-7082)和药物处理细胞,Western Blotting检测p-JNK,p-ERK,p-p65,IκBα,IKKα和IKKβ蛋白表达变化,用细胞计数仪检测加入抑制剂后T淋巴细胞的数目变化。结果:SMP(25、50、100μg/mL)和SDSS(6.25、12.5、25μM)可剂量依赖性的促进PBMC和CIK细胞增殖,显著提高T淋巴细胞的杀伤能力;不同程度增强IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γmRNA和TLR1、TLR2、TLR4 mRNA基因表达;Western blotting结果证实SMP(25、50、100μg/m L)和SDSS(6.25、12.5、25μM)处理外周血淋巴细胞24 h后,使p-ERK、p-JNK、IKKα、IKKβ表达上调,且p-ERK、p-JNK和IKKβ蛋白表达呈剂量依赖性,IκBα蛋白表达下调,细胞质内p-p65蛋白表达呈剂量依赖性下调,细胞核内p-p65蛋白表达呈剂量依赖性上调。U0126、SP600125和BAY11-7082抑制剂阻断信号通路后,SMP和SDSS药物处理组MAPK和NF-κB信号通路相关蛋白表达量显著降低,淋巴细胞数目减少。结论:SMP和SDSS能通过Toll样受体激活MAPK和NF-κB信号通路促进T淋巴细胞增殖,增强T淋巴细胞的杀伤作用,提高机体免疫力。