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人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属β疱疹家族,在人群中感染非常普遍。正常人机体内,HCMV处于一种潜伏的状态。但在免疫功能受损患者(如器官移植、恶性肿瘤、AIDS病)体内,HCMV可被激活,进而引起一系列的临床症状。目前,HCMV在体内的活化或潜伏细胞尚不十分明确。 树突状细胞(DC)是免疫系统强有力的抗原递呈细胞,在免疫应答中起关键的引导和调节作用,其成熟程度、亚群分类决定着免疫激活与免疫耐受之间的平衡,DC的成熟程度为引发T淋巴细胞依赖性免疫应答必需的条件之一。 有研究发现HCMV能够感染多种类型的细胞,如表皮细胞,内皮细胞,成纤维细胞以及单核/巨噬细胞等。HCMV能否感染单核细胞来源的DC并影响其功能,从而有助于其潜伏在宿主细胞内,将是本研究的主要内容。实验共分三部分:一、HCMV能否感染DC。二、观察受染DC功能变化,包括抗原吞噬能力、膜表面免疫应答相关分子以及刺激同种异基因淋巴细胞增殖能力。三、初步探讨HCMV引起受染细胞上述变化的分子机制。 第一部分研究中,普通光镜及透射电镜的结果显示,利用rhGM-CSF、rhIL-4、LPS组合在体外可诱导人外周血单核细胞为DC,获得的未成熟DC细胞膜表面突起相对较短,胞质中细胞器较少;而成熟DC细胞膜表面有大量皱褶和突起,胞内线粒体丰富,溶酶体少量,胞核大、不规则。 应用一定滴度(50TCID50)的HCMV感染DC,检测HCMV对DC细胞的感染效率。透射电镜观察,在HCMV处理的DC胞核及胞浆内均见到成熟的人类疱疹病毒样颗粒:作用12h后,