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研究目的：1整理张亚强老师治疗膀胱癌经验；2观察中医辨证治疗联合膀胱灌注治疗预防非肌层浸润性膀胱癌术后1年复发率和2年复发率；3揭示扶正消癥汤对小鼠膀胱癌生长抑制作用和细胞免疫的影响。研究方法：本课题由三部分组成,首先是对导师张亚强老师治疗膀胱癌的治疗经验进行整理总结。其次是对2014-10-08至2016-03-31期间至张亚强老师门诊就诊的膀胱癌患者跟踪随访,分析其中非肌层浸润性膀胱癌患者1年复发率和2年复发率；最后是通过体内研究观察扶正消癥汤的抑瘤作用和对实验动物细胞免疫的影响。具体研究方法1临床研究1.1病例收集收集2014-10-08至2016-03-31期间于张亚强老师门诊就诊,接受中药治疗的非肌层浸润性膀胱癌患者的病史资料,记录患者每次门诊的就诊资料。1.2调查内容1.2.1一般资料及病情信息：姓名、性别、年龄、手术时间、手术方式、术后病理、膀胱灌注治疗史、复发情况。1.2.2中医治疗信息：初次就诊时间、服药疗程、接受中药治疗后复查结果、如有复发则收集复发病理结果。2实验研究部分2.1建立Balb/c小鼠MB49细胞膀胱癌肩胛移植瘤动物模型,观察移植瘤的生长趋势,验证模型的可行性;2.2制作扶正消癥汤中药拌饲饲料,混合饲料饲喂荷瘤小鼠,观察小鼠日进食量,验证中药拌饲给药的可行性；2.3将30只Balb/c小鼠接种MB49细胞悬液后,按体重随机分为对照组、扶正消癥汤低剂量组和扶正消癥汤高剂量组,每组10只,雌雄各半。给予对照组常规鼠食,给予低剂量组含低剂量中药混合饲料,给予高剂量组含高剂量中药混合饲料。每日观察小鼠体重、瘤径、食重的变化。给药15天后,将各组小鼠采用断颈法处死,无菌条件下剥离原发瘤,称重,计算小鼠肿瘤抑制率。肿瘤抑制率=对照组平均瘤重-实验组平均瘤重/对照组平均瘤重×100%2.4通过流式细胞技术,观察扶正消癥汤给药15天后对膀胱癌小鼠脾脏CD4+、CD8+的影响；2.5通过elispot检测扶正消癥汤对膀胱癌小鼠脾脏淋巴细胞INF-γ分泌影响。研究结果：1临床研究结果至随访结束,1年内共有5名患者复发,1年以上至2年复发1例。中药干预的膀胱癌患者术后1年复发率为8.2%,所有复发患者均为中高危,占所有已知中高危患者(41例)的14.6%。由于仅有37例患者观察至2年,而在这37例患者中,有1人于1年内复发,1人于2年内复发,故2年复发率观察为5.4%。复发的6名患者,术后复发风险均较大,其中中危2例,高危4例。中药治疗前复发患者2例。其中,距术后时间间隔最短为2.8月,最长为13.2月,平均复发时间为7.2月。中药治疗后复发截止随访最短时间为7.9月,最大为30.9月,平均时间为16.2月。至随访期,有4名患者出现了复发(术后超过2年),其中3例分别于术后29.9月、32.8月、80.1月复发,均行经尿道膀胱肿瘤电切术,病理依次为高级别尿路上皮癌(原为低级别尿路上皮癌)、乳头状尿路上皮癌高级别(原为膀胱尿路上皮异形增生)1例术后病理为非浸润性尿路上皮癌高级别(原为移行细胞癌Ⅱ-Ⅲ级)。另外1例之前病理为移行细胞癌Ⅱ-Ⅲ级,浸润粘膜固有层,于86.3月后发现复发,术后病理发展为肌层浸润,随后行膀胱全切加输尿管皮肤造瘘术。中药干预前复发1次的患者中,复发时距原发时间最短6.4月,最长41.9月。平均复发时间为17.4月。疗后至随访时间无肿瘤生存平均时间为37月,其中最短14.3月,最长71月。复发2次患者中,复发时距原发时间平均复发间隔为18.4月,其中最短6.1月,最长20.8月。服药后至随访时间,无瘤生存平均时间44月,最短13月,最长82月。2体内实验研究结果2.1扶正消癥汤抑瘤作用结果高剂量组瘤重0.81±0.17g,低剂量组瘤重0.91±0.15g,对照组瘤重为1.04±0.30g。高剂量组瘤重最小为0.47g,最大值为1.10g;低剂量组瘤重最小值为0.72g,最大值为1.23g；对照组瘤重最小值为0.75g,最大值为1.65g。在瘤重上,高剂量组与对照组比较具有统计学意义(P<0.05),低剂量组与对照组比较无统计学意义(P>0.05),高剂量组与低剂量组比较亦无显著性差异(P>0.05)。高剂量组抑瘤率为22.3%,低剂量组抑瘤率为11.9%。2.2扶正消癥汤对膀胱癌小鼠脾脏CD4+、CD8+的影响结果对各组CD4+T细胞进行比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中药高剂量组CD4+T为21.11±3.54,中药低剂量组为21.06±4.86,对照组为22.74±3.45。中药高剂量组CD8+T细胞为7.14±1.46,中药低剂量组为5.56±±0.89,对照组为4.84±0.44。各组CD8+T淋巴细胞间,中药高剂量组与对照组相较,高剂量组与低剂量组相较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。中药低剂量组与对照组相较,差异无统计学意义(P>0.05)。中药高剂量组CD4+/CD8+为3.05±0.83,中药低剂量组为4.06±1.58,对照组为4.791.19。中药高剂量组和对照组相较,比值具有统计学意义(P<0.05),高剂量组与低剂量组及低剂量组与对照组比值之间差异无统计学意义(P>0.05)。2.3扶正消癥汤对膀胱癌小鼠脾脏淋巴细胞INF-γ分泌影响实验孔斑点数/阴性对照孔斑点数>2为阳性结果,中药高剂量组、低剂量组和对照组均表现为阳性。各组斑点数差异不具有统计学意义(P>0.05),表现出中药高剂量组斑点数均值>中药低剂量组斑点数均值>对照组斑点数均值。比较各组实验组斑点数与阴性对照组的比值,发现中药高剂量组与低剂量组之间,高剂量组与对照组之间均具有统计学意义(P<0.05),低剂量组与对照组之间无统计学意义(P>0.05)。结论：1中药能够有效预防膀胱癌术后复发,提高膀胱灌注治疗的整体疗效,具有延长无疾病生存期的作用。2扶正消癥汤对肿瘤表现出明显的生长抑制作用,表现为随着剂量的增高,对肿瘤的干预也逐渐趋于明显。3扶正消瘤汤可通过升高CD8+T细胞以增强免疫细胞对肿瘤的特异性杀伤作用以达到抑瘤作用。扶正消癥汤可通过促进小鼠脾淋巴细胞INF-γ的分泌,以增强的免疫杀伤作用。