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目的:本研究旨在探讨Survivin基因在卵巢癌顺铂耐药中的作用、机制以及与其他细胞凋亡调控基因的关系,探索反义Survivin寡核苷酸对顺铂化疗的增敏作用及其机理,探讨Survivin基因作为肿瘤基因治疗一个新的靶点的可行性。 方法:1.采用反义Survivin寡核苷酸转染COC1/DDP细胞以及梯度浓度顺铂分别作用于COC1细胞和COC1/DDP细胞;2.采用免疫荧光标记法、Western blot和荧光定量RT-PCR检测梯度顺铂作用后两种细胞株中SurvivinmRNA及蛋白表达的变化以及COC1/DDP转染前后Survivin mRNA及蛋白表达的变化;3.流式细胞仪检测梯度顺铂作用后两种细胞株以及转染前后COC1/DDP细胞的凋亡及细胞周期的变化;4.三磷酸腺苷生物发光法检测梯度顺铂作用后两种细胞株的抑制率以及转染后COC1/DDP细胞协同顺铂作用后的抑制率。5.酶活性试剂及Western blot检测不同浓度顺铂作用于COC1、COC1/DDP细胞及反义Survivin寡核苷酸作用耐药细胞株COC1/DDP后caspase-3的表达和活性的变化6.采用免疫荧光标记法、Western blot和RT-PCR检测COC1细胞和COC1/DDP细胞中P53、bcl-2表达的差异以及COC1/DDP转染后表达的变化。