湖南野生狗牙根种质资源遗传多样性研究

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本实验以采集自湖南省内的30份野生狗牙根(Cvnodon dactylon)种质资源为研究材料,从形态学和分子水平研究探讨其遗传多样性。研究结果表明:1、湖南野生狗牙根种质资源在13个形态特征上出现较大变异,其中叶宽、根系深、叶色、叶毛和叶面积的变异都达到了30%以上。相关分析表明:草层越高,狗牙根叶片越窄,叶面积越小,叶色也越浅,而其茎节间长度越大;叶片越长的狗牙根,其叶面积越大,叶毛也越显著;狗牙根叶片宽度越大,其叶片面积也会相应较大;茎节间长度越长,狗牙根的茎色和叶色也就越浅;茎节直径越大的狗牙根,其叶毛往往也越发不明显;狗牙根的匍匐茎越长,其叶片的颜色会相应较浅;叶毛越长,狗牙根的茎色就越浅;狗牙根茎色颜色越深,其叶色也越深。2、形态性状进行聚类分析表明:在欧氏距离7.178处将30份野生狗牙根种质资源材料分为5个大类,每个大类狗牙根的外部表现型与其生长的自然环境,尤其表现在与海拔、经纬度的密切相关。3、根据供试材料在长沙地区的生长绿期,初步筛选出了适合在长沙用于草坪栽培的3份供试材料。4、本研究探索并确立了适合于狗牙根ISSR-PCR分子标记的最佳反应体系。5、本文采用ISSR分子标记技术对30份湖南野生狗牙根种质资源的遗传多样性进行研究。10个引物共扩增出167个位点,其中165个为多态位点,占98.80%。POPGENE分析结果表明:狗牙根具有丰富的遗传变异(在单份材料水平上,H=0.1883,I=0.3137;在群体水平上,PPL=24.60%,H=0.0947,I=0.1404)。Nei’s遗传多样性分析表明,各群体间产生了一定程度的遗传分化(Gst 0.4963)。最低遗传多样性水平出现在长株潭狗牙根群体,而最高遗传多样性水平出现在张家界狗牙根群体。根据Nei’s遗传距离(D),利用UPGMA法构建的12个群体的遗传关系聚类图得出:岳阳狗牙根群体和常德狗牙根群体遗传距离最近,优先聚成一支;娄底狗牙根群体和邵阳狗牙根群体,与其它狗牙根群体遗传距离相距较远。这与其地理分布格局大致吻合,即群体间的地理距离较近,其遗传距离也相对较小。6、利用ISSR数据结果,使用NTSYS-pc2.10软件计算出的湖南省30份野生狗牙根材料间遗传相似系数(GS)值为0.6407~0.8862。采用UPGMA法对供试30份材料进行聚类分析表明,在GS=0.75处,可把30份狗牙根分为3个类群。根据ISSR遗传相似系数划分的类群与地理分布有一定关系。这与主成分分析结果较为一致。7、从形态学水平和DNA水平的标记的聚类分析来看,聚类结果不完全相同。这是因为形态特征受环境影响较大且不很稳定,用于检测的形态标记有限;DNA标记是直接从核酸遗传物质的角度探讨其遗传变异,能揭示更多的遗传信息,但检测的灵敏度和效率因方法不同而有一定差异。形态和ISSR分子标记从不同层次上揭示了狗牙根的遗传多样性,不能以一种方法代替另一种方法,只有相互结合,综合分析,才能够较全面地揭示狗牙根的遗传本质综合上述研究结果可以得出,湖南省野生狗牙根在形态学和DNA分子标记的遗传多样性丰富。
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