多囊卵巢综合征(Polycystic ovarian syndrome，PCOS)是育龄期妇女常见内分泌疾病，发病率为5％-10％，主要表现为高雄激素血症和无排卵，包括多毛，不孕，月经紊乱。PCOS患者常伴有胰岛素敏感度下降30％—40％，与Ⅱ型糖尿病相似。PCOS患者的远期并发症表现为糖尿病和心血管异常，高血压的发病率比正常人增加3倍，绝经后40％的PCOS患者有糖耐量异常。目前认为胰岛素抵抗和动脉粥样硬化是一种慢性炎症的紊乱，慢性炎症因子可以预测PCOS患者患Ⅱ型糖尿病的危险性。有关PCOS中慢性炎症的研究大部分集中在血液学方面的研究，对卵巢组织慢性炎症的研究仅有一篇4例小样本的报道。本文收集大样本研究PCOS患者外周血中白细胞分布，糖脂代谢，炎症因子及卵巢组织中炎症细胞的变化，探索PCOS卵巢组织局部白细胞数量，PCOS的慢性炎症与下丘脑—垂体—卵巢轴紊乱，糖脂代谢的关系，为PCOS的抗炎治疗提供临床实验依据。 第一部分多囊卵巢综合征妇女血液中白细胞计数和血脂改变及其与卵巢轴异常关系的研究 目的：研究PCOS患者血液中白细胞计数和血脂改变及其与卵巢轴异常关系。 方法：随机抽取临床门诊就诊的病人中178例未经药物治疗的PCOS患者，PCOS的诊断参照鹿特丹标准；对照组选取因男方不孕在生殖中心就诊的59例正常妇女。年龄在16-40岁之间。在PCOS患者和正常妇女的卵泡期或无排卵期抽取空腹静脉血，并有肝素抗凝，检测月经第三天卵巢功能，血浆C反应蛋白，血常规，血脂代谢，空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)，空腹胰岛素(fasting blood insulin，FBI)。卵巢功能主要检测检测卵泡刺激素(follicle stimulating hormone，FSH)，黄体生成素(luteinizing hormone，LH)，睾酮(testosterone，T)。血脂代谢主要检测甘油三脂(triglyceride，TG)，低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)，高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)，载脂蛋白—A(apolipoprotein—A，Apo—A)，载脂蛋白—B(apolipoprotein—B，Apo—B)。 结果：外周血PCOS患者白细胞总数与正常妇女相比没有统计学差异(6.879±2.251vs6.385±1.480，P=0.182)，中性粒细胞也无统计学差异(3.806±1.856vs3.908±1.368，P=0.743)，但是淋巴细胞和单核细胞比均正常妇女显著升高(2.524±0.641vs1.987±0.578，P<0.001；0.435±0.156vs0.382±0.116，P=0.049)，PCOS患者CRP显著高于对照组(2.536±2.971vs0.959±1.146，P=0.001)。PCOS患者中LH/FSH≥2组或BMI<23组淋巴细胞明显高于正常妇女组(2.507±0.493vs1.987±0.578，P<0.001；2.358±0.513vs2.066±0.586，P=0.030)，CRP在BMI<23组明显升高(1.655±2.343vs0.854±0.965，P=0.043)，在LH/FSH≥2组有升高趋势(1.482±2.176vs0.834±0.738.P=0.069)。PCOS患者中多重回归分析单核细胞与BMI、LH/FSH正相关(P=0.033；P=0.672)。PCOS患者血脂代谢中甘油三酯的浓度明显高于正常妇女组(1.176±0.735vs0.883±0.504，P=0.019)，其余血脂代谢指标均无明显统计学差异。 结论：证实PCOS患者外周血中淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞数目明显增加，且CRP显著增高提示PCOS患者体内存在慢性炎症反应。LH/FSH≥2和正常体重的妇女外周血中CRP增高，淋巴细胞明显升高。因此LH可能通过刺激淋巴细胞的增殖，使下丘脑—垂体—卵巢轴紊乱型PCOS患者产生异常的慢性炎症反应。胰岛素抵抗型PCOS患者可以通过脂肪组织分泌异常增多炎症因子，其作用于单核—巨噬细胞系统，刺激单核细胞的增殖和巨噬细胞的分泌。 同时证实中国PCOS患者中血脂代谢异常主要是由于甘油三酯的浓度升高。甘油三酯的升高可以使脂肪细胞肥大，从而刺激脂肪细胞分泌TNF—α、IL—6，加重PCOS患者异常的慢性炎症反应。成为诱导PCOS发生及发展的不可忽视的重要原因之一。 第二部分PCOS血液中炎症因子的研究 目的：研究PCOS血清中肿瘤坏死因子—α(tumor necrosis factor—alpha，TNF—α)，白介素—6(interleukin—6，IL—6)的水平。 方法：随机抽取临床门诊就诊的94例未经药物治疗的PCOS患者。PCOS的诊断参照鹿特丹标准；对照组选取因男方不孕在生殖中心就诊的74例月经规律的正常妇女。年龄在16-40岁之间。运用ELISA的方法检测外周血中TNF—α，IL—6的水平。 结果：PCOS血清中TNF—α(2.299±1.758vs1.746±1.762，P=0.041)和L—6(1.218±1.602vs0.508±0.398，P<0.001)浓度明显高于正常妇女。LH/FSH≥2组TNF—α和L—6均比正常妇女组高(P=0.04/，P<0.001) 结论：我们的研究证实PCOS患者血液中的TNF—α和IL—6浓度高于正常妇女。TNF—α和IL—6与慢性炎症存在密切关系，从炎症因子的角度说明PCOS患者在存在异常的慢性炎症反应。我们的研究证实下丘脑—垂体—卵巢轴紊乱型的PCOS患者血液中TNF—α和IL—6的浓度最高。推测较高的LH通过刺激淋巴细胞异常增殖，导致机体中TNF—α和IL—6的异常升高。是导致PCOS相关病理改变的重要原因。 第三部分PCOS卵巢局部组织中慢性炎症的研究 目的：研究PCOS卵巢组织中的慢性炎症。 方法：查找并收集1997年至2009年中山一院病理科符合要求的卵巢石蜡标本。在临床参照鹿特丹标准已诊断为PCOS，进行腹腔镜下卵巢楔形切除或者激光打孔治疗的妇女，手术中进行卵巢活检的53例石蜡标本作为研究组。同期原发不孕在临床腹腔镜下检查时，进行卵巢活检未发现原因的不明原因不孕妇女的48例卵巢组织石蜡标本作为对照组(知情同意并经过伦理委员会通过)。用抗CD3抗体标记淋巴细胞，抗CD14抗体标记巨噬细胞，采用免疫组化的方法检测卵巢组织中淋巴细胞和巨噬细胞的数量。 结果：PCOS组卵巢组织局部巨噬细胞数目的数目为2.426±1.887/HP，正常妇女组为1.214±1.231/HP，差异有统计学意义(P=0.002)。PCOS患者组卵巢组织局部淋巴细胞数目每高倍镜下的数目1.508±1.012，正常妇女组为1.093±0.730，差异无统计学意义，但PCOS组淋巴细胞有升高趋势(P=0.067)。 结论：PCOS患者卵巢间质组织中巨噬细胞数目增加，淋巴细胞有升高趋势。证实PCOS卵巢中存在异常增强的慢性炎症反应。淋巴细胞和巨噬细胞数目增多可能是PCOS患者卵巢中主导卵泡形成障碍的原因之一。