[目 的]探讨氯胺酮及联合乙醇长期滥用对中老年小鼠产生类阿尔兹海默症神经退行性病变的神经机制。[方 法]根据随机数字表,将小鼠随机分为4组(n=18):空白对照组(C组)、乙醇对照组(E组)、氯胺酮注射组(K组)、氯胺酮联合乙醇灌胃组(KE组),每组分为两个亚组:3月组和6月组。小鼠饲养至12周龄开始给药,氯胺酮(30mg/kg)和20%乙醇(2ml/kg)分别采用腹腔注射和灌胃给药的方式,按体重给药,每天给药1次,连续给药3个月、6个月,空白对照组腹腔注射等量生理盐水。应用免疫组织化学染色实验方法检测小鼠前额叶皮质、纹状体、海马脑区组织中β-淀粉样蛋白(Aβ)和Tau蛋白的表达变化,应用Western Blot方法检测小鼠前额叶皮质、纹状体、海马脑区组织中Tau(phospho Thr231)、Tau(phospho S396)、Tau(phospho Ser404)、GSK-3β、GSK3 beta(phospho Ser9)和 PP2A 蛋白的表达变化。[结 果]免疫组织化学染色实验结果:3月组,K组的前额叶皮质、纹状体和海马脑区内,Aβ蛋白和Tau蛋白表达量最高,随着给药时间的延长Aβ蛋白和Tau蛋白表达量逐渐降低。Western Blot实验结果:各磷酸化Tau蛋白与Tau蛋白的比值能更好的反应相关脑区Tau蛋白的磷酸化情况。Tau(phospho Thr231)和Tau(phospho S396)磷酸化位点,KE组小鼠纹状体和海马区内蛋白表达最高且呈现给药时间依赖性关系。Tau(phospho Ser404)磷酸化位点,KE组小鼠前额叶皮质、纹状体和海马脑区内蛋白表达均最高,且KE组中纹状体内Tau蛋白的三个磷酸化位点表达均比海马脑区高。Tau蛋白磷酸化状态主要受蛋白激酶(GSK-3β)和蛋白磷酸酯酶(PP2A)的调控,而GSK-3β的活性受其Ser9位点磷酸化的影响。GSK-3β蛋白,在小鼠前额叶皮质、纹状体和海马脑区内各组之间没有显著性差异。3月给药组中,KE组小鼠前额叶皮质内GSK3 beta(phospho Ser9)蛋白表达最高并呈给药时间依赖关系。GSK3 beta(phospho Ser9)蛋白,K组小鼠纹状体内蛋白表达最高,给药6月后KE组小鼠纹状体内蛋白表达最高;在小鼠海马区内3月及6月组内K组表达最高。PP2A蛋白表达量随着氯胺酮及联合乙醇滥用时间的延长逐渐下降。[结 论]1.氯胺酮长期滥用可致成年期小鼠前额叶皮质、纹状体、海马脑区组织中Aβ蛋白和Tau蛋白表达增加。2.氯胺酮联合乙醇长期滥用可致老年期小鼠前额叶皮质、纹状体、海马脑区组织中Tau蛋白在Thr231、S396和Ser404位点过磷酸化。3.氯胺酮可能通过激活GSK-3β活性且抑制PP2A活性而促进Tau蛋白过磷酸化。4.乙醇可能通过增加GSK-3β活性来协同促进氯胺酮导致Tau蛋白过磷酸化,使纹状体为易受脑区。