精液保存技术的发展使精液的利用不受种公畜年龄及地域的限制,显著扩大了优良种公畜的利用空间,有利于家畜品种的改良和育成。精液保存方法分为液态保存和冷冻保存。目前除了牛精液的冷冻技术已经完善,猪、羊等其他家畜的精液冷冻保存效果仍不理想。冷冻精液虽然能够实现长期保存,但山羊冷冻精液的受胎率较低(<50%)。与之相比,液态精液的受胎率较高些,但保存时间较短。液态精液保存过程中,精子活力下降快,阻碍人工授精技术的发展和推广。因此,提高精液保存质量成为加速绒山羊良种扩繁的关键。本试验利用假阴道法采集辽宁绒山羊精液,进行了精液低温和冷冻保存研究,筛选了辽宁绒山羊低温保存及冷冻保存稀释液的最佳配方,并探讨了精液稀释、降温、平衡及冷冻方法对精液品质的影响。其试验结果如下:1.辽宁绒山羊精液低温保存稀释液筛选将精液随机分为四组,分别用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号稀释液对精液进行低温保存。其结果,Ⅰ号稀释液、Ⅱ号稀释液对辽宁绒山羊精液低温保存的效果在精子活力、顶体完整率、质膜完整率皆显著高于Ⅲ号和Ⅳ号稀释液(P<0.05)。用Ⅰ号和Ⅱ号稀释液低温保存精液第6d后,精子的活力分别为35.83%和30.0%,顶体完整率为75.07%和75.60%,质膜完整率为30.54%和30.87%,有效保存时间能达到6d。2.EDTA-2Na对辽宁绒山羊精液低温保存的影响在Ⅱ号稀释液中添加一定浓度的EDTA-2Na,经低温保存可以提高精子活力、精子顶体完整率和质膜完整率。在添加浓度分别为Ommol·L-1、0.4mmol·L-1、0.8mmol·L-1、1.2mmol·L-1,随添加浓度提高,精液保存效果有更好的趋势。当EDTA-2Na的添加量为1.2mmol·L-1时,精液的保存效果最好。精液低温保存第6d后,精子活力、顶体完整率、质膜完整率分别为39.03%、82.35%、30.09%。3.GSH对辽宁绒山羊精液低温保存的影响在 Ⅱ 号稀释液中分别添加 Ommol·L-1、2.5mmol·L-1、5mmol·L-1、7.5mmol·L-1、1Ommol·L-1浓度的GSH时,精液低温保存后其品质没有提高。当GSH添加量为5mmol·L-1时,在精液低温保存的第5d、第6d的精子顶体完整率分别为77.76%、77.27%,显著高于其他处理组(P<0.05)。4.辽宁绒山羊精液冷冻保存液筛选分别用蔗-柠配方冷冻保存液与乳-柠配方冷冻保存液对精液冷冻保存,解冻后精子活力分别为40.0%和40.83%,两个组之间差异不显著(P>0.05)。5.冷冻保存液中甘油添加量的筛选当甘油添加量为4%时,乳-柠配方冷冻保存液对精液冷冻-解冻后的效果最好,精子活力为23.33%。添加量为5%甘油组的蔗-柠配方冷冻保存液和5%、6%甘油组的乳-柠配方冷冻保存液对精液冷冻-解冻后的精子活力分别为40.00%、40.83%和40.51%,显著高于添加4%甘油组(P<0.05)。6.冷冻程序的筛选冷冻程序,当细管竖直放置进入冷冻系统时,用5%甘油蔗-柠配方冷冻保存液与5%、6%甘油乳-柠配方冷冻保存液对精子冷冻-解冻后的效果较好,精子活力分别为41.0%、42.83%和41.53%,组间差异不显著(P>0.05)。7.精液稀释方法的筛选采用一次稀释法用含5%、6%甘油的乳-柠配方保存液冷冻-解冻后的效果最好,精子活力分别为45.67%、45.50%,顶体完整率分别为76.19%、80.55%,质膜完整率为24.43%、26.62%。8.精液降温方法的筛选含有5%、6%甘油的乳-柠配方冷冻保存液采用隔水降温法处理,冷冻-解冻后的效果最佳。精子活力、顶体完整率与质膜完整率依次为,45.67%、45.50%,76.19%、80.55%,28.77、26.62%。9.人工输精试验本试验中用含1.2mmol·L-1 EDTA-2Na的Ⅱ号配方低温保存精液,将保存3d的和4d的精液分别用于人工输精,受胎率为66.70%和46.90%。综上所述,Ⅰ和Ⅱ号稀释液对精液低温保存的效果较好,在Ⅱ号稀释液中添加1.2mmol·L-1的EDTA-2Na时,能提高精液的保存效果。在Ⅱ号稀释液中添加GSH不能提高精液的保存效果。在乳-柠冷冻保存配方中添加5%或6%甘油;使用一次稀释液法稀释;降温时采用隔水降温法;并且在冷冻时细管竖直放置进入冷冻程序时;冷冻-解冻后精液的保存效果最佳。