【摘 要】
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本论文是以研究PstI限制性内切酶对宿主基因组的影响为目的。把带有 PstI基因的质粒转入到RosettaTM菌中,在30 oC条件下加入终浓度为1 mM IPTG诱导表达PstI内切酶,通过体外酶
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本论文是以研究PstI限制性内切酶对宿主基因组的影响为目的。把带有 PstI基因的质粒转入到RosettaTM菌中,在30 oC条件下加入终浓度为1 mM IPTG诱导表达PstI内切酶,通过体外酶切实验证实,产生的PstI蛋白具有正常的II型限制性内切酶功能。经研究发现产生的PstI内切酶可以将宿主基因组切开,被切开的基因组随后会被DNA酶降解,最后可以得到没有基因组的细菌空壳。在诱导3小时后,用DAPI进行染色,在激光共聚焦显微镜下观察的结果说明 RosettaTM菌的基因组被完全降解。因此使用这个方法可以得到一个不含基因的蛋白系统和一个完好的细菌外壳。
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