目的： 帕金森病(Parkinson disease，PD)即震颤麻痹(paralvsis agitans)，是中、老年人常见的慢性神经系统变性疾病，发病率位居老年神经系统退行性疾病第2位。左旋多巴(L-Dopa)是治疗PD有效的药物，是多巴胺(DA)的合成前体。L-Dopa进入脑后转化为DA，可以改善帕金森病的运动障碍。近年发现帕金森病患者常伴有明显的抑郁症状。引起PD病人产生抑郁症状的原因很多，其中L-Dopa的毒副作用有可能是造成或加重抑郁症状的原因之一。L-Dopa处理可诱发实验动物的氧化应激状态，使黑质致密部羟自由基形成增加、纹状体脂质过氧化水平增高以及DA氧化代谢产物形成增多，这些在损害黑质多巴胺神经元的同时，也可能损害5-HT神经系统，导致或加重帕金森病患者的抑郁。已有研究表明抑郁与5-羟色胺(5-HT)能神经元的功能障碍密切相关。本实验在以往的L-Dopa神经毒性研究的基础上，选用正常大鼠，给予L-Dopa，探讨其对5-HT能神经元的毒性作用。 方法： 选用健康雄性wistar大鼠24只，体重250g～280g，随机分为实验组和对照组，每组12只。实验组用纯度99％的L-Dopa溶于1 ml生理盐水，100mg/kg灌胃45天，2次/日；对照组用1 ml生理盐水灌胃45天，2次/日。免疫组织化学染色：取实验组和对照组wistar大鼠各6只，多聚甲醛灌注30分钟固定，取脑干下丘部位切片，分别用于5-HT和TPH免疫组织化学染色，部分用于阴性对照，切片经0.01 mol/LPBS液(PH7.4)漂洗3次，5％山羊血清室温封闭，加一抗5-HT(1：8000)，TPH(1:1000)，4℃孵育48 h，加生物素标记的第二抗体，室温孵育2 h，加辣根过氧化物酶溶液，室温孵育1h，每步间均以0.01mol/L TBS液(PH7.4)漂洗3次，入DAB显色液呈色5分钟后中止反应，贴片、封片。流式细胞学检测：取实验组和对照组wistar大鼠各6只，直接断头取脑，取脑干下丘部位脑组织，将组织块放入铜网上。先加少量生理盐水冲洗，然后用眼科剪刀将组织块剪碎并研磨，边研磨边加生理盐水，制得组织匀浆，过滤后离心．500-800转×3分钟。去上清，取细胞悬液加抗体，上流式细胞仪检测5-HT和TPH表达量的高低。 结果： 1、免疫组织化学染色显示：(1) 正常大鼠脑干5-HT能神经元主要集中在中脑下丘阶段。低倍镜下观察中缝背核整体形态呈喷泉状。高倍镜下观察5-HT免疫组化染色观察细胞呈棕褐色，胞体大小均一，多呈椭圆形，胞浆内染色颗粒均一，胞核可见。TPH免疫组化染色观察与5-HT显示结果相一致。(2)L-Dopa对大鼠脑干5-HT能神经元细胞数目的影响：计数结果显示，对照组中缝背核5-HT免疫反应阳性神经元数目为43.79±5.35；实验组5-HT免疫反应阳性神经元数目为38.40±3.16，P>0.05。(3)实验组与对照组5-HT能神经细胞灰度值比较：5-HT灰度值测定对照组为107.84±9.25，实验组为116.16±11.8，P<0.05；TPH灰度值测定对照组为87.16±6.85，实验组为101.6±13.23，P<0.01。(4)实验组与对照组5一HT能神经元直径变化的比较：中缝背核背侧部和中缝背核腹侧部对照组阳性细胞直径为15.26±2.57μm，实验组阳性细胞直径为13.98±2.72μm，P<0.05，两组间细胞直径减小了8.38％；中缝背核腹外侧部对照组阳性细胞直径均数为15.39±2.62μm，实验组阳性细胞直径均数为13.26±2.60μm，P<0.01，两组间细胞直径减小13.84％。 2、流式细胞结果：对照组中脑下丘节段5-HT免疫反应阳性神经元5-HT的表达量为545.02±56.86，实验组为444.48±35.35，比对照组减少了18.45％，P<0.05；对照组TPH免疫反应阳性神经元的TPH表达量为690.80±56.63，实验组为553.37±27.98，比对照组减少了19.90％，P<0.05。 结论： 本实验研究结果表明L-Dopa未能引起大鼠脑内5-HT能神经元的明显死亡，但长期应用可以引起5-HT能神经元的功能减低，从而可能诱发或者加重帕金森病患者的抑郁。