局灶性脑缺血对成年大鼠海马齿状回神经发生的长期影响

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目的:观察局灶性脑缺血再灌注损伤对成年大鼠海马齿状回内细胞增殖和神经发生的长期影响。方法:经右侧颈总动脉插入线栓阻塞大鼠大脑中动脉,2小时后撤出线栓建立成年SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,从第3天开始连续5天,每天2次序贯性腹腔注射5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)标记分裂细胞的方法并结合免疫组织化学方法,对脑损伤后的2周、6周以及6个月的大鼠脑片进行BrdU、DCX、NeuN、GFAP和PV的单标、双标记染色,应用激光扫描共焦显微镜观察成年大鼠海马齿状回神经前体细胞的增殖情况和神经发生,确定新生神细胞的迁移、分化成熟及其存活情况。用相同的标记方法在另一组大鼠脑缺血再灌注损伤后6周进行腹腔注射BrdU,在最后一次注射后的2周、6周时观察新生神经元的增殖、迁移存活情况。结果:局灶性脑缺血再灌注损伤后损伤侧产生大量BrdU标记的新生神经细胞,这些新生神经细胞绝大部分都能够分化成为表达NeuN的成熟颗粒神经元,并且至少存活6个月。损伤侧海马齿状回的神经细胞增殖反应被增强并且呈持续增殖状态,在损伤后第2周、6周和6个月时损伤侧脑片海马齿状回内表达DCX的新生神经元均明显多于对侧。当大鼠脑缺血性损伤6周后采用同样的方法连续5天,每天2次腹腔注射BrdU,在最后一次注射后的2周和6周时,发现在损伤侧脑片齿状回内标记的新生神经细胞仍明显多于对侧,并且这些新生神经细胞绝大部分都能够分化成熟为颗粒神经元。结论:短暂的局灶性脑缺血损伤可以增强成年海马齿状回内神经发生并且能够持续增殖,而且这些新生神经元能够正常发育并长期存活。
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