【摘 要】
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在本实验室以前的工作中，曾采用一株抗人精子膜蛋白的单克隆抗体YWK-Ⅱ对大鼠睾丸λgtllcDNA文库进行表位筛选，得到1.8kb长的cDNA片段，命名为RSD-2（GenBank Accession Number：M31322）。进一步以RSD-2为探针对人睾丸cDNA文库进行筛选，对所得数个阳性克隆进行拼接，结合5’RACE延伸的方法获得3135bp长的人YWK-Ⅱ抗原cDNA序列，命名为HS
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在本实验室以前的工作中，曾采用一株抗人精子膜蛋白的单克隆抗体YWK-Ⅱ对大鼠睾丸λgtllcDNA文库进行表位筛选，得到1.8kb长的cDNA片段，命名为RSD-2（GenBank Accession Number：M31322）。进一步以RSD-2为探针对人睾丸cDNA文库进行筛选，对所得数个阳性克隆进行拼接，结合5’RACE延伸的方法获得3135bp长的人YWK-Ⅱ抗原cDNA序列，命名为HSD-2，其开放阅读框（ORF）编码590个氨基酸（AA）。经同源性分析，发现YWK-Ⅱ抗原与老年性痴呆症A4蛋白前体（APP）存在广泛的同源性与区域保守性，具有与APP对应的典型一次跨膜结构特点，即由胞外区，疏水的穿膜区和胞内区所组成。YWK-Ⅱ抗原也与从人胎盘文库中发现的APP基因家族的另一个成员APPH／APLP2高度同源，提示YWK-Ⅱ抗原与APP同属一个蛋白超家族，二者的同源区域可能具有相似的功能。 本文首先应用荧光原位杂交技术（FISH）观察了YWK-Ⅱ抗原基因在人染色体中的定位，结果显示YWK-Ⅱ抗原基因定位于人染色体11q2.4-2.5，与APP的21号染色体定位结果不同。 利用间接免疫荧光法曾发现YWK-Ⅱ抗原定位于人精子头部赤道区，目前认为这一区域可能是精卵膜融合的起始部位。为了研究YWK-Ⅱ抗原可能具有的功能，本文针对其不同区段的序列特点，采用基因工程技术将YWK-Ⅱ抗原的三个功能区段在大肠杆菌以及真核细胞中进行表达，并对胞内区表达蛋白的功能进行了初步探索。 分析YWK-Ⅱ抗原胞外区序列特征后发现，其有一个紧接于跨膜区的127个AA残基区域与APP无显著同源性。以往的研究表明，根据该区域中一段16AA顺序设计的多肽抗原能引起雌性小鼠不育。另外，位于胞外区与跨膜区连接部位有3个连续的Ser也很有特点，预测可能与糖基化或磷酸化作用相关。为了了解YWK-Ⅱ抗原胞外区中上述与APP无同源性
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