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本研究采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分型方法和序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP)分型方法,研究宁夏回、汉族原发性高血压患者(EH)与健康对照组间HLA-DQA1、-DQB1基因多态性以及单倍型的分布差异,其中回族EH组112例,回族对照组136例,汉族EH组122例,汉族对照组80例。利用HLA-DQ等位基因频率对26个不同民族和地区人群计算遗传距离并进行聚类分析,推测人群的起源、迁徙、融合等进化发展的关系。
研究发现宁夏回族EH组和对照组中,DQA1*0301等位基因出现频率为28.0%比3.1%,x2值为40.144;宁夏汉族EH组和对照组中,DQA1*0301等位基因出现频率为20.5%比5.6%,x2值为17.126,OR值为12.234和4.324,提示DQA1*0301与宁夏地区原发性高血压的易感性相关。而DQAl*0401,*0601在回族EH组和对照组中频率分别为30.2%比8.4%、16.9%比3.7%,x2值分别为30.020、7.641;在汉族EH组和对照组中分别为2.3%比8.6%、11.1%比20.0%,x2值分别为20.701、6.185;以上p<0.05,提示DQAl*0401、*0601是宁夏地区回、汉族原发性高血压的保护基因。
单倍型分析表明,DQA1*0301-DQB1*0302、DQA1*0301-DQBl*0301和DQA1*0501-DQB1*0301单倍型在回族EH组和对照组中所占频率分别为9.5%比0、7.9%比0,7.8%比0,提示以上3种单倍型与宁夏回族原发性高血压的发生有关。而DQA1*0501-DQB1*0302单倍型在EH组和对照组中的频率为5.6%比0,提示DQA1*0501-DQB1*0302单倍型与汉族原发性高血压的发生有关。回族健康人群中出现频率最高的单倍型为DQA1*0103-DQB1*0303和DQA1*0501-DQB1*0303。汉族健康人群中出现频率最高的单倍型为DQA1*0401-DQB1*0501。
用算术平均的不加权聚群(UPGMA)法进行聚类分析,构建的分子系统树显示宁夏回族和宁夏汉族聚为一类,表明聚类关系与民族和地区人群所处的地理位置基本呈平行关系。从得到的聚类中可以看出,中国人可以分为南北两大群体。