【摘 要】
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本文分别采用分子量为5000、10000、20000的单甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEG-ALD5k、10k、20k)、分子量为5000、10000、20000的单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺(mPEG-MAL5k、10k、20k)和分
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本文分别采用分子量为5000、10000、20000的单甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEG-ALD5k、10k、20k)、分子量为5000、10000、20000的单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺(mPEG-MAL5k、10k、20k)和分子量为5000的单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺(mPEG-SPA5k)对纤维素酶(Cellulase)进行化学修饰,制得七种修饰纤维素酶。通过修饰度的测定、红外光谱、红外显微光谱等手段对修饰前后的纤维素酶进行表征,并分别对它们的动力学性质(如:最适反应条件、米氏常数和热稳定性)进行了测定。在NaOH/尿素与微晶纤维素构成的均相体系中,分别采用天然纤维素酶和修饰纤维素酶降解纤维素,以DNS显色法检测的体系还原糖浓度来表征酶解效果。通过考察反应条件对酶解的影响,得到最佳酶解条件。通过对比发现,修饰纤维素酶的耐碱性明显增强。在离子液体[Gly]BF4体系中,利用天然纤维素酶和修饰纤维素酶分别对壳聚糖进行降解,以乌氏粘度法测定的产物壳聚糖的分子量来表征壳聚糖酶解效果。通过实验数据可知,修饰纤维素酶降解壳聚糖的反应效果要明显优于天然纤维素酶,其中Cell-ALD10K的催化活性最高,说明通过化学修饰后纤维素酶的催化活性得到了提高。以修饰纤维素酶Cell-ALD10K为催化剂,分别对离子液体[Gly]BF4体系和HAC体系中壳聚糖酶解反应进行了研究,分别采用乌氏粘度法和吸光度法测定产物的分子量,并系统考察了反应条件对酶解的影响,得到最佳反应条件:在[Gly]BF4体系下,pH=5.0,修饰纤维素酶用量12mL,反应温度50℃,反应时间5h,乌氏粘度法测得产物中析出的低分子量壳聚糖的分子量为1.21×104,吸光度法测得反应液中未析出甲壳低聚糖的分子量为1500左右,并通过计算得出甲壳低聚糖的收率为76.36%。
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