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蚊虫是疟疾、登革热、寨卡热等多种虫媒疾病致病因子的传播媒介。深入研究蚊虫抵御真菌等病原体免疫应答机制对于媒介昆虫的防治研究具有重要意义。肽聚糖识别蛋白在多种生物体内的免疫应答机制中均起到重要作用,本文着力于研究埃及伊蚊Aedes aegypti体内肽聚糖识别蛋白PGRP-LC(AaPGRP-LC)在应答病原体感染过程中的功能。1、采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,对阴沟肠杆菌Enterobactercloacae感染埃及伊蚊后,宿主体内抗菌肽(AMPs)基因在不同时间点的转录情况进行定量分析,发现在埃及伊蚊感染阴沟肠杆菌6h后,埃及伊蚊体内抗菌肽基因的转录水平显著升高,表明埃及伊蚊体内重要抗菌肽基因的转录可以帮助机体应对病原体的侵染。2、使用RNA干扰技术成功干扰AaPGRP-LC基因后,借助qPCR技术分析宿主免疫相关基因转录水平的变化,进而在RNA干扰AaPGRP-LC基因的基础上使用阴沟肠杆菌感染埃及伊蚊,发现宿主体内重要抗菌肽基因的转录水平显著降低,表明在埃及伊蚊响应细菌感染的过程中,AaPGRP-LC起到了重要的调控作用。同时埃及伊蚊免疫缺陷(immune-deficiency,IMD)通路和 Toll 信号(Toll-like receptors)通路的相关免疫基因的表达量也显著降低。说明AaPGRP-LC在参与调控IMD通路的同时,也可能参与了Toll信号通路的调控过程。3、借助原核表达系统表达并纯化AaPGRP-LC,结合Western blotting方法检测所纯化蛋白的质量,最终获得免疫印迹分析结果为单一条带的AaPGRP-LC蛋白,该重组蛋白可用于进一步的功能研究。