基于量子点荧光探针的纳米标记技术及细胞毒性研究

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量子点是近年发展起来的新型荧光探针,具有非常优良的光谱性能,已经引起了人们的广泛重视,特别是水溶性的量子点,在生物医学研究领域有着非常广阔的应用前景。在水相中直接合成水溶性量子点,并将其应用于生物分析科学中成为该领域的研究热点。本文在水相中直接合成了量子点,并进一步对其生物应用与生物相容性进行了研究,具体开展了以下工作:1、基于量子点荧光探针对胃癌细胞相关抗原CA242进行了检测。首先在水溶液中直接合成性能优良的量子点荧光纳米颗粒,并在其表面成功修饰了羊抗小鼠IgG和聚乙二醇,制备了功能化的水溶性量子点荧光探针。利用该功能化量子点荧光探针对胃癌细胞相关抗原CA242进行检测,并进一步与传统的基于荧光染料标记的免疫荧光分析方法进行了比较。实验结果表明:该功能化的探针能够有效地识别胃癌细胞相关抗原CA242,并且在光稳定性和灵敏度方面都较传统的基于荧光染料标记的免疫荧光分析方法有明显的改善,从而为CA242的相关检测以及胃癌的诊断与愈后判断提供了新的方法。2、基于荧光共振能量转移技术,结合量子点和金纳米颗粒优良的光谱特性,发展了一种用于人IgG检测的新型免疫分析方法。首先在金纳米颗粒和量子点表面分别标记了羊抗人IgG和人IgG,通过抗体间的特异性结合,量子点和金纳米颗粒的空间距离发生改变,二者之间发生荧光共振能量转移,从而使量子点的荧光强度降低;如果检测体系中有人IgG存在时,人IgG与金纳米颗粒表面的抗体结合,再向其中加入标记了人IgG的量子点时,荧光共振能量转移进程受到阻碍,量子点的荧光强度随体系中人IgG浓度的增大而升高,通过检测量子点荧光强度的变化实现了对人IgG的检测。本方法操作简便,快速,具有较好的特异性,为人IgG的检测发展了一种新型的免疫分析技术,并可进一步应用于其他生物分子的测定研究。3、采用MTT分析方法及流式细胞检测技术,结合Hoechst 33258染色方法,系统考察了巯基乙酸包被的CdTe量子点对Hela细胞的毒性。研究结果显示:在一定浓度范围内,CdTe量子点具有较好的生物相容性,从而为量子点在生物医学研究中的应用提供了坚实的基础。
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