【摘 要】
：
在我们的工作中,通过聚合酶链式反应(PCR)从大肠杆菌E. coli基因组中克隆到透性酶基因aroP(p)(携带自身的启动子),aroP(不携带自身的启动子),调控基因tyrR,转氨酶基因tyrB和
论文部分内容阅读
在我们的工作中,通过聚合酶链式反应(PCR)从大肠杆菌E. coli基因组中克隆到透性酶基因aroP(p)(携带自身的启动子),aroP(不携带自身的启动子),调控基因tyrR,转氨酶基因tyrB和天冬氨酸酶基因aspA.并对它们分别进行了串联表达与功能研究.由tyrR基因编码的TyrR是大肠杆菌芳香氨基酸生物合成和运输途径中的一种全局性调控蛋白.控制着包括自身编码基因tyrR在内,涉及苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸合成与运输的8个转录单元的转录,并具有ATP酶活力.arop基因编码一种跨膜主动运输芳香氨基酸的透性酶(AroP),其转录受TyrR蛋白抑制.aspA基因编码天冬氨酸(转氨)酶(AspA)、tyrB基因编码芳香族氨基酸转氨酶(AT).L-天冬氨酸可以作为氨基供体,由AT催化相应底物生成L-苯丙氨酸,而前者又能在AspA作用下由延胡索酸和无机氨得到.因此,将aspA与tyrB基因串联表达,只要提供前体物,就可以同时或分别得到阿斯巴甜的两种基本原料.我们以aroP(p)-tyrR,arop-tyrR顺序一起克隆到pλP<,R>质粒上构成双串联表达载体.并将它们导入E. coliWT5中,用大细胞法检测到它们的表达并分别测定了它们的酶活力.结果发现携带aroP(p),aroP基因的菌株吸收苯丙氨酸的能力分别提高到原来的1.40和1.46倍;携带tyrR基因的菌株可以将E. coliWT5 ATP酶活力提高到原来的1.69倍;携带aroP-tyrR的菌株运输苯丙氨酸的能力明显高于携带aroP(p)-tyrR菌株.同时也发现,这三个基因高表达会降低E. coliWT5生产苯丙氨酸的能力.以tyrB-aspA的顺序一起克隆到pλP<,R>质粒上构成双串联表达载体,然后转化到E. coli P2392菌株并进行蛋白质表达和酶活力检测.结果发现携带aspA和双串联基因的菌株比受体菌株AspA活力分别提高到1.62与1.58倍;携带tyrB和双串联基因的菌株比受体菌株TyrB活力分别提高到1.86与1.75倍.
其他文献
水稻(Oryza sativa L)是我国最重要的粮食作物,全国约有近65%的人口以稻米为主食。田间杂草在水稻的生产种植过程中危害严重,破坏水稻品质,造成水稻减产。施用化学药剂除草是目前农业生产上最经济、最有效的方法。草甘膦由于其高效、低毒、低残留、非选择性、杀草广谱性而成为农业生产使用面积最广、销量最大的除草剂。但由于草甘膦是非选择性除草剂,直接在农田使用会杀死杂草的同时对水稻也产生严重药害。因
目的:探讨言语康复治疗在脑卒中基底节性失语治疗中应用价值.方法:2018.3-2019.3,选取80名脑卒中基底节性失语患者开展实验,将其等分为X组和Y组,X组给予常规治疗,Y组在X组治
人脸识别在机器学习与数字图像处理领域是一个非常受欢迎但又极具有挑战性的课题。因为它有许多优点,比如非接触性、隐蔽性、以及图像采集设备成本低等,已经被越来越多地应用
利用Plackett-Burman设计和响应面优化方法，对蜜蜂球囊菌ND-2摇瓶生产淀粉酶和脂肪酶的培养基成分进行优化，以提高其生产量。 淀粉酶优化后的产淀粉酶培养基组成为麦芽糖45.
目的:尿毒症患者需要通过血液透析来维持生命,但是在血透过程中,极易出现院内感染事件,本文主要探究院内感染的危险因素,以供有关人士参考.方法:回顾性分析我院在2019年1月-2
目的:研究针刺配合患肌运动疗法治疗周围性面瘫的效果.方法:以60例周围面瘫患者为研究对象,分为对比组和观察组,对比组采用针刺疗法,观察组为针刺配合患肌运动疗法.结果:对比
野螟族隶属于鳞翅目螟蛾总科草螟科野螟亚科.该文分为总论和各论两大部分对中国大陆的野螟族作了系统研究.根据分类学的研究结果,对论文所涉及到的属进行了系统发育探讨.运用
随着数字处理技术的迅速发展，迫切需求更高速度、更高精度的ADC，折叠插值架构ADC继承了全并行ADC的高速特点，同时降低了电路中比较器的数目，成为设计超高速ADC的首选架构之一。另
目的:分析研究对产妇产时及产后出血护理中综合护理干预的应用效果.方法:选取本院2019年01月-2020年01月收治的122例产时及产后出血产妇开展本次试验研究,分组方式选取数字表
20世纪60年代以来，人类对矿物资源、能源的需求量不断增加，开始大规模地开发和探索海洋。近年来相继发展起来的海洋高科技开发技术有海水淡化技术、深海探测与深潜技术、大洋钻