【摘 要】
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目的:观察大鼠耳蜗螺旋神经节神经元（Spiral Ganglion Neuron,SGN）AMPAR（α-氨-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体）各亚单位m RNA表达水平与大脑皮层神经元表达差异;观察水杨酸钠（Sodium Salicylate,SS）作用SGN后,AMPA受体亚单位m RNA及蛋白表达情况,以探讨AMPA受体在SGN兴奋毒性中的作用。方法:急性分离培养原代SGN,采用免疫荧
【基金项目】
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项目名称:AMPA受体-多巴胺受体的相互作用介导水杨酸钠耳毒性的研究,项目合同编号:2018GXNSFAA281173,项目来源:广西壮族自治区自然科学基金项目,项目起止时间:2019-01至2021-12; 项目名称:水杨酸钠的螺旋神经节神经元损害中DR介导NMDAR与GABAaR相互作用的研究,项目合同编号:81560174,项目来源:国家自然科学基金项目,项目起止时间:2016-01至201
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目的:观察大鼠耳蜗螺旋神经节神经元（Spiral Ganglion Neuron,SGN）AMPAR（α-氨-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体）各亚单位m RNA表达水平与大脑皮层神经元表达差异;观察水杨酸钠（Sodium Salicylate,SS）作用SGN后,AMPA受体亚单位m RNA及蛋白表达情况,以探讨AMPA受体在SGN兴奋毒性中的作用。方法:急性分离培养原代SGN,采用免疫荧光技术检测SGN中AMPA受体定位的表达;生理状态下培养大脑皮层神经元后采用FQ-PCR技术,检测SGN和大脑皮层神经元中AMPAR各亚单位m RNA的表达;将急性分离培养的原代SGN分为正常对照组和药物处理组,采用FQ-PCR和Western Blot技术检测SGN中AMPA受体亚单位m RNA与蛋白表达的改变。结果:免疫荧光显示,SGN胞体和轴突上均有AMPAR的表达。FQ-PCR发现,（1）SGN及大脑皮层神经元中AMPA受体各亚单位Glu A1、Glu A2、Glu A3和Glu A4（简称A1、A2、A3、A4）均有表达。其中SGN中除A2和A4的表达量差异无统计学意义（P>0.05）外,其余亚单位之间表达量差异具有显著意义（PA2/A4>A1。在大脑皮层神经元中,AMPA受体各亚单位之间表达量差异均具有统计学意义（PA3>A1>A4。SGN与大脑皮层神经元的比较发现,A1、A2的表达量低于大脑皮层神经元,A3、A4的表达量高于大脑皮层神经元（P0.05）。（3）5m MSS作用后,30min时,AMPA受体全部亚单位表达量均降低（P<0.05）;在1h和3h,只有A2和A3表达量降低（P<0.05）;在6h,A2、A3、A4表达量降低（P<0.05）。Western Blot结果显示,5m MSS作用SGN 30min后,A2的膜蛋白表达量显著降低（P<0.05）,总蛋白表达量变化无统计学差异。结论:（1）SD大鼠SGN有AMPA受体各亚单位表达,可能Glu A2/A3组合为主的功能型受体。（2）在SS致SGN兴奋毒性中,主要的功能型AMPA受体发生内化。
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