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目的:本实验主要研究不同侵势力细胞株差异蛋白的筛选及14-3-3β在食管鳞癌和食管正常组织中的表达情况,并探讨差异蛋白14-3-3β与临床病理参数之间的关系,以及预后的相关性。方法:本研究首先利用Transwell侵袭小室从食管癌Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系。采用18O标记定量蛋白质组学筛选出差异蛋白并通过免疫组化化学SP法检测组织芯片中78对食管鳞癌和其配对的癌旁组织中14-3-3β的表达。结果:(1)筛选出Eca-109T0和Eca-109T4不同转移潜能高侵袭能力食管癌细胞株。(2)建立了稳定高效的18O标记技术,共分离鉴定出Annexin Al, PRPSIL1, HSP90,14-3-3等蛋白,其中14-3-3蛋白差异表达在1.5倍以上。(3)在食管鳞癌和癌旁组织中14-3-3β在细胞核和细胞质的表达分别为69.2%(54) vs30.8%(24)、62.8%(49) vs17.9%(14),其在食管鳞癌的表达均显著高于癌旁组织,具有统计学意义(P<0.01);14-3-3β与食管癌的分化程度有关,具有统计学意义(P<0.01),与年龄、淋巴结转移、TNM分期、浸润深度、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论:(1)建立了不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系,将可以用于探讨食管癌转移机制的研究。(2)18O标记定量蛋白质组学能够准确定量并鉴定食管癌差异蛋白,该技术为肿瘤的分子靶标的筛查提供了新的技术平台。(3)免疫组化验证差异蛋白表达水平和8O标记定量蛋白组结果一致。(4)14-3-3β在食管鳞癌中表达上调,该蛋白在食管鳞癌中高表达于细胞核和细胞质。(5)14-3-3β与肿瘤分化程度呈正相关,肿瘤分化程度越低,14-3-3β表达越高。(6)14-3-3β与患者性别、年龄、TNM分期、肿瘤的大小和生存率无相关性。